[发明专利]一种基于Transwell孔板上室培养细胞下室吸附分离外泌体的方法和应用在审
| 申请号： | 201910262033.6 | 申请日： | 2019-04-02 |
| 公开（公告）号： | CN109929802A | 公开（公告）日： | 2019-06-25 |
| 发明（设计）人： | 殷义霞;邵锜;王文武;李宾斌;韩颖超;张明曦 | 申请（专利权）人： | 武汉理工大学 |
| 主分类号： | C12N5/0775 | 分类号： | C12N5/0775;C12N5/0797;C08J3/075;C08L5/08;C08L89/00 |
| 代理公司： | 北京志霖恒远知识产权代理事务所(普通合伙) 11435 | 代理人： | 朱昀 |
| 地址： | 430070 湖*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种基于Transwell孔板上室培养细胞下室吸附分离外泌体的方法和应用，属于生物医学技术领域。本发明首先配制含有大量氨基正离子的水溶性聚合物溶液，灭菌后转移至Transwell孔板下室；然后将具有分泌外泌体能力的细胞转移至装有完全培养基的Transwell孔板上室进行细胞培养；上室细胞孵化过程中分泌外泌体的同时由于静电和渗透压作用，外泌体穿过孔板被下室内聚合物牢牢抓住，再通过离心处理除去混入下室的小粒径杂质，从而实现外泌体自发分离的目的，分离效率高。另外，本发明还可根据不同的实验目的，可通过去质子化和离心处理将外泌体进一步从材料中分离，便于后续的分子分析和应用。 | ||
| 搜索关键词： | 孔板 上室 下室 离心处理 培养细胞 吸附 分泌 细胞培养 水溶性聚合物溶液 应用 氨基 生物医学技术 渗透压作用 室内聚合物 完全培养基 分离效率 分子分析 去质子化 细胞转移 静电 体能力 小粒径 正离子 灭菌 混入 配制 孵化 穿过 细胞 | ||
【主权项】：
1.一种基于Transwell孔板上室培养细胞下室吸附分离外泌体的方法，其特征在于：首先配制含有大量氨基正离子的水溶性聚合物溶液，灭菌后转移至Transwell孔板下室；然后将具有分泌外泌体能力的细胞转移至装有完全培养基的Transwell孔板上室，并在低氧条件下进行细胞培养；上室细胞孵化过程中在低氧刺激下分泌外泌体的同时由于静电作用和渗透压作用，外泌体穿过孔板被下室内聚合物牢牢抓住；细胞培养结束后，收集下室聚合物溶液进行第一低速离心处理，得到含有外泌体的聚合物溶液。
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