[发明专利]一种双重DNA机器检测microRNA-21的方法有效
| 申请号： | 201910288202.3 | 申请日： | 2019-04-11 |
| 公开（公告）号： | CN110004214B | 公开（公告）日： | 2023-01-31 |
| 发明（设计）人： | 徐建国;陈伟;秦盼柱;闫超;张超;王昕昕;高岩 | 申请（专利权）人： | 合肥工业大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6844 | 分类号： | C12Q1/6844;C12Q1/6806 |
| 代理公司： | 南京利丰知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 32256 | 代理人： | 王锋 |
| 地址： | 230009 安*** | 国省代码： | 安徽;34 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种双重DNA机器检测microRNA‑21的方法。所述方法包括：在microRNA‑21存在的情况下，采用T4连接酶将5’端磷酸化处理的锁式探针连接形成环状DNA模板；并在DNA聚合酶和限制性核酸内切酶的同时作用下引发环状DNA机器运转，得到单链产物；使所述单链产物与回文发夹探针杂交，得到杂交双链，并实现双向DNA机器的循环链置换扩增，得到扩增产物；对反应体系中扩增产物的荧光信号进行检测，获得microRNA‑21的浓度。本发明具有很高的miRNA‑21检测灵敏度，检测限为10fM，而且具有良好的特异性，是一种通用的核酸检测平台。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 双重 dna 机器 检测 microrna 21 方法 | ||
【主权项】：
1.一种双重DNA机器检测microRNA‑21的方法，其特征在于包括：在microRNA‑21存在的情况下，采用T4连接酶将5’端磷酸化处理的锁式探针连接形成环状DNA模板；并在DNA聚合酶和限制性核酸内切酶的同时作用下引发环状DNA机器运转，得到单链产物；使所述单链产物与回文发夹探针杂交，得到杂交双链，且使杂交双链中回文发夹探针的3’端进行分子间互补配对，在DNA聚合酶和限制性核酸内切酶作用下实现双向DNA机器的循环链置换扩增，得到扩增产物；对反应体系中扩增产物的荧光信号进行检测，获得microRNA‑21的浓度。
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