[发明专利]一种复制可控型流感病毒的检测方法在审
| 申请号： | 201910290093.9 | 申请日： | 2019-04-11 |
| 公开（公告）号： | CN109971888A | 公开（公告）日： | 2019-07-05 |
| 发明（设计）人： | 戴东升;张文捷;李会强;周德敏;马闻箫 | 申请（专利权）人： | 浙江森卫生物医药发展有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/6851 |
| 代理公司： | 北京信诺创成知识产权代理有限公司 11728 | 代理人： | 陈悦军 |
| 地址： | 311200 浙江省杭州市萧山区*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种复制可控型流感病毒的检测方法。待检测的病毒通过病毒拯救的方式获得，在稳定整合并表达流感病毒PA、PB1、PB2和NP基因的细胞株中引入复制可控的流感病毒拯救系统，该系统包含在PA、PB1、PB2和NP基因中分别引入了终止密码子的质粒。该检测方法的特点在于通过生产用细胞实现病毒复制增殖，再通过qPCR方法测量并代入根据野生型病毒测量获得的Ct值曲线获得病毒量。该检测方法具有较强的特异性、较好的重复性和较高的精密度。 | ||
| 搜索关键词： | 流感病毒 检测 复制 可控型 流感病毒PA 野生型病毒 终止密码子 病毒复制 病毒拯救 方法测量 拯救系统 病毒量 可控的 细胞株 引入 整合 质粒 增殖 测量 病毒 细胞 生产 | ||
【主权项】：
1.一种复制可控型流感病毒的定量检测方法，其特征在于：将待测病毒液与生产用细胞共培养，随后提取总RNA并逆转录为cDNA，最后根据已知拷贝数的野生型病毒qPCR的Ct值结果绘制标准曲线，代入复制可控型流感病毒的Ct值，计算获得流感病毒拷贝数。
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