[发明专利]鼠种的分子鉴定方法在审
| 申请号： | 201910311739.7 | 申请日： | 2019-04-18 |
| 公开（公告）号： | CN109943644A | 公开（公告）日： | 2019-06-28 |
| 发明（设计）人： | 姚丹丹;姜洪雪;冯志勇 | 申请（专利权）人： | 广东省农业科学院植物保护研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/6888 | 分类号： | C12Q1/6888;C12Q1/6806 |
| 代理公司： | 广州市华学知识产权代理有限公司 44245 | 代理人： | 郭炜绵 |
| 地址： | 510640 *** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种鼠种分子鉴定方法，该方法包括以下步骤：提取待测鼠种的基因组DNA；分别应用特异性引物扩增线粒体细胞色素C氧化酶亚基I基因和线粒体细胞色素b基因，然后测序；将测定序列在NCBI网站上运行Blast核酸序列同源性检索，比对结果中同源性最高的序列为亲缘关系最近的鼠种。本发明中，PCR引物、反应程序通用性强，方法简单易操作，可以快速准确的进行鼠类鉴定，弥补形态学鉴定的缺陷，同时，采用CO I和cyt b两条基因序列进行相互验证提高了鉴定结果的准确性。除了在分类学上鉴定鼠种外，本发明的分子鉴定方法通过分析种属间的CO I和cyt b基因序列特征对于研究生物遗传多样性和系统进化有重要意义。 | ||
| 搜索关键词： | 分子鉴定 线粒体细胞色素 核酸序列同源性 特异性引物 形态学鉴定 遗传多样性 基因组DNA 比对结果 反应程序 基因序列 鉴定结果 亲缘关系 通用性强 序列特征 研究生物 重要意义 同源性 氧化酶 测序 扩增 鼠类 网站 检索 进化 验证 基因 应用 分析 | ||
【主权项】：
1.一种鼠种分子鉴定方法，其特征在于包括以下步骤：(1)提取待测鼠种的基因组DNA；(2)分别应用特异性引物扩增线粒体细胞色素C氧化酶亚基I基因和线粒体细胞色素b基因，然后测序；(3)将测定序列在NCBI网站上运行Blast核酸序列同源性检索，比对结果中同源性最高的序列为亲缘关系最近的鼠种；步骤(2)中，用于扩增CO I基因的引物对的序列如下：正向引物CO I‑F：5’‑CCTACTCRGCCATTTTACCTATG‑3’(SEQ ID NO.1)；反向引物CO I‑R：5’‑ACTTCTGGGTGTCCAAAGAATCA‑3’(SEQ ID NO.2)；用于扩增cyt b基因的引物对的序列如下：正向引物cyt b‑F：5’‑‑CAGCATTTAACTGTGACTAATGAC‑3’(SEQ ID NO.3)；反向引物cyt b‑R：5’‑‑TACACCTAGGAGGTCTTTAATTG‑3’(SEQ ID NO.4)。
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