[发明专利]一种淡水鱼类线粒体12S通用宏条形码扩增引物及其应用方法

摘要

本发明公开了一种淡水鱼类线粒体12S通用宏条形码扩增引物及其应用方法，属于生物技术领域。本发明依据常见淡水鱼类线粒体12S基因序列设计了16条宏条形码扩增引物，包括6条上游引物和10条下游引物，该引物对对鱼类群落覆盖度广、扩增效率高，引物组合可以扩增出长度为70bp至350bp的产物，兼容不同高通量测序平台，这种多引物组合的方法可以降低非特异性扩增，提高PCR成功率，可广泛用作特征条码序列进行鱼类物种鉴定、鱼类多样性分析等研究。

主权项

1.一种淡水鱼类线粒体12S通用宏条形码扩增引物，其特征在于：包括至少一条上游引物和一条下游引物组合的引物对，所述的上游引物为Fish‑F1：TCGTGCCAGCCACCGCGGTTA、Fish‑F2：AACGTCAGGTCGAGGTGTAGCG、Fish‑F3：AGCATCTCNCTTACACNGAGAA、Fish‑F4：GTACCTTTTGCATCATGATTTAG、Fish‑F5：AGAAAGCGTTAAAGCTC、Fish‑F6：GAAGACCCTNTGGAGCTT；所述的下游引物为Fish‑R1.1：ATAGTGGGGTATCTAATCCCAG、Fish‑R1.2：TTNTAGAACAGGCTCCTCTAGG、Fish‑R2.1：AGAGTGACGGGCGGTGTGTNCG、Fish‑R2.2：TTCTCNGTGTAAGNGAGATGCT、Fish‑R3.1：TTCCCTTGCGGTACTTTNTCTAT、Fish‑R3.2：CTAAATCATGATGCAAAAGGTAC、Fish‑R4：CCACTCTTTTGCCACAGAGACG、Fish‑R5：TCTTNTTACTCATNTTAGC、Fish‑R6.1：CCGNGGTCGCCCCAACC、Fish‑R6.2：AACTNGGTNCGTTGATCGG。