[发明专利]一种酶促催化EGCG甲基化的方法在审
| 申请号： | 201910353717.7 | 申请日： | 2019-04-28 |
| 公开（公告）号： | CN110106213A | 公开（公告）日： | 2019-08-09 |
| 发明（设计）人： | 杨鑫;安泰;朱威宇;陈博;陈志雄;涂丛慧;卢秋华;焦琳;郑晓卫;金渭武 | 申请（专利权）人： | 中粮营养健康研究院有限公司;清华海峡研究院（厦门）;厦门茶叶进出口有限公司 |
| 主分类号： | C12P17/06 | 分类号： | C12P17/06;C12N9/10;C12R1/19 |
| 代理公司： | 北京信慧永光知识产权代理有限责任公司 11290 | 代理人： | 董世豪;张淑珍 |
| 地址： | 102209 北京市*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种酶促催化EGCG甲基化的方法，其中，通过从整合有来自Benifuuki茶叶的O‑甲基转移酶基因的重组大肠杆菌的培养物中制备粗酶液，并且在特定条件下进行酶促催化反应，从而实现了将EGCG高效地甲基化的效果。 | ||
| 搜索关键词： | 甲基化 酶促催化 甲基转移酶基因 重组大肠杆菌 催化反应 粗酶液 培养物 酶促 整合 制备 茶叶 | ||
【主权项】：
1.一种酶促催化EGCG甲基化的方法，其中，所述方法包括如下步骤：(1)对整合有来自Benifuuki茶叶的O‑甲基转移酶基因的重组大肠杆菌进行培养，得到重组大肠杆菌培养物；(2)将所述重组大肠杆菌培养物进行离心，收集菌体，随后向所述菌体中加入PBS缓冲液进行重悬，超声破碎，离心收集上清液，从而得到含有O‑甲基转移酶的粗酶液；(3)向EGCG的水溶液中添加所述粗酶液、S‑腺苷基甲硫氨酸和MgCl2，酶促催化0.5‑2h，其中，相对于EGCG的水溶液的体积而言，加入40％v/v‑60％v/v的所述粗酶液、终浓度为150μmol/L‑170μmol/L的所述S‑腺苷基甲硫氨酸和终浓度为190μmol/L‑210μmol/L的所述MgCl2。
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