[发明专利]一种外源ABA处理对番茄花粉成熟的细胞学影响的探究方法

摘要

本发明公开了一种外源ABA处理对番茄花粉成熟的细胞学影响的探究方法，涉及农业技术领域，其包括以下步骤：S1、样本准备：番茄澳粉208自交系为实验样本；S2、试剂准备：脱落酸(ABA)：a,0μM浓度的ABA；b,10μM浓度的ABA；c,100μM浓度的ABA；d,1000μM浓度的ABA；甲二氢愈创木酸(NDGA)：e,0μM浓度的NDGA；f,10μM浓度的NDGA；g,100μM浓度的NDGA；h,1000μM浓度的NDGA。本文分别以不同浓度的ABA及NDGA溶液处理番茄花药，以探索引起花粉败育的有效药剂浓度，研究结果将为进一步阐明ABA调控植物雄蕊发育的分子机制、揭示雄性不育的调控机理同时也为ABA相关的雄性不育在育种工作中的应用提供一定的理论基础。

主权项

1.一种外源ABA处理对番茄花粉成熟的细胞学影响的探究方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、样本准备：番茄澳粉208自交系为实验样本；S2、试剂准备：脱落酸(ABA)：a,0μM浓度的ABA；b,10μM浓度的ABA；c,100μM浓度的ABA；d,1000μM浓度的ABA；甲二氢愈创木酸(NDGA)：e,0μM浓度的NDGA；f,10μM浓度的NDGA；g,100μM浓度的NDGA；h,1000μM浓度的NDGA；将以上试剂分别放入备用器皿中，方便后续使用；S3、试剂使用后对正常花粉的百分率检测(1)选取小孢子时期的花蕾，使用注射器取药液用针头轻轻掰开萼片，将药液注入花药处；(2)将花蕾立即放入FAA固定液，真空抽气20‑30Min，固定24h后进行石蜡切片制作；(3)经FAA固定液固定的样品，经叔丁醇梯度脱水之后，包埋在石蜡中，在轮转切片机上进行切片，然后将切片放在干净的载玻片上，加去离子水浮片，之后放在烘箱中进行烘片；(4)样品烘片后，在二甲苯中去蜡，然后经梯度乙醇复水后，在海氏苏木精染液中染色；(5)再经梯度乙醇脱水后，经1％固绿复染，经二甲苯透明之后用加拿大树胶封片观察，使用显微镜来统计正常花粉的百分率。