[发明专利]一种基于CRISPR-Cas13a的特异性核酸片段的检测方法及探针

摘要

本发明公开了一种基于CRISPR‑Cas13a的特异性核酸片段的检测方法，该方法的检测体系中含有：crRNA、Cas13a、探针；该方法的特征在于：所述的探针包含1段RNA序列，该RNA序列的两端分别连接1段DNA序列；所述探针上的核苷酸均进行硫代磷酸骨架的修饰，以在相邻核苷酸之间形成硫代磷酸酯键；所述RNA序列上的若干个核苷酸还进行了二甲氧基修饰，并且，所述的RNA序列上至少含有两个连续的未进行二甲氧基修饰的核苷酸。所述的DNA序列含有6个脱氧核糖核苷酸。所述的RNA序列含有为8‑12个核糖核苷酸。本发明设计的探针稳定高，荧光背景值低。

主权项

1.一种基于CRISPR‑Cas13a的特异性核酸片段的检测方法，该方法用于非诊断目的的检测，该方法的检测体系中含有：crRNA、Cas13a、探针；所述的crRNA包含针对目的基因的靶点设计的向导序列；所述的Cas13a通过所述的crRNA识别目的基因上的靶点后，能够激活Cas13a的RNA酶活性，并对所述的探针进行切割，从而获得检测信号；该方法的特征在于：所述的探针包含1段RNA序列，该RNA序列的两端分别连接1段DNA序列；所述探针上的核苷酸均进行硫代磷酸骨架的修饰，以在相邻核苷酸之间形成硫代磷酸酯键；所述RNA序列上的若干个核苷酸还进行了二甲氧基修饰，并且，所述的RNA序列上至少含有两个连续的未进行二甲氧基修饰的核苷酸。