[发明专利]一种同时检测养殖对虾五种典型病原的多重巢式PCR扩增引物及试剂盒

摘要

本发明公开了一种同时检测养殖对虾五种典型病原的多重巢式PCR扩增引物，包括五种病原SHIV、EHP、WSSV、IHHNV和VPAHPND的引物组，其中：所述引物组的核苷酸序列如SEQ IDNO.1～20所示，本发明还公开了包含上述引物的试剂盒以及采用上述引物检测五种病原的非疾病检测目的多重巢式PCR检测方法，通过设计外扩和内扩引物，优化并确定外扩和内扩反应的退火温度、dNTP、EX Taq enzyme、五种对虾病原引物的PCR反应浓度等参数，一方面保证可满足同时检测对虾养殖生产危害较大的SHIV、EHP、WSSV、IHHNV和VPAHPND等五种病原的需求，另一方面可达到较高的灵敏度。

主权项

1.一种同时检测养殖对虾五种典型病原的多重巢式PCR扩增引物，其特征是包括五种病原SHIV、EHP、WSSV、IHHNV和VP_AHPND的引物组，其中：所述病原SHIV的外扩引物序列如SEQ IDNO.1～2所示；所述病原SHIV的内扩引物序列如SEQ IDNO.3～4所示；所述病原EHP的外扩引物序列如SEQ IDNO.5～6所示；所述病原EHP的内扩引物序列如SEQ IDNO.7～8所示；所述病原WSSV的外扩引物序列如SEQ IDNO.9～10所示；所述病原WSSV的内扩引物序列如SEQ IDNO.11～12所示；所述病原IHHNV的外扩引物序列如SEQ IDNO.13～14所示；所述病原IHHNV的内扩引物序列如SEQ IDNO.15～16所示；所述病原VP_AHPND的外扩引物序列如SEQ IDNO.17～18所示；所述病原VP_AHPND的内扩引物序列如SEQ IDNO.19～20所示。