[发明专利]一种提取纯化桦褐孔菌三萜的方法

摘要

本发明属于桦褐孔菌三萜制备方法技术领域，具体涉及一种提取纯化桦褐孔菌三萜的方法。本发明提取纯化桦褐孔菌三萜的方法，包括有提取、分离、精制和干燥四个步骤，其中提取步骤采用循环柱层析提取法，分离步骤采用大孔树脂吸附法，精制步骤采用沉淀法，干燥步骤采用喷雾干燥或超低温冷冻干燥法，极大地提高了桦褐孔菌三萜的提取率。

主权项

1.一种提取纯化桦褐孔菌三萜的方法，其特征在于包括以下步骤：(1)原料预处理选择成熟干燥的桦褐孔菌，清水冲洗表面杂质后在45℃干燥至含水量为2‑5％，粉碎成桦褐孔菌粉末；(2)原料浸泡按桦褐孔菌粉末质量与提取溶剂体积之比为1:2.5‑3g/mL的比例加入提取溶剂，在45‑50℃下浸泡材料0.5‑1.5小时，制成样品；(3)装柱将步骤(2)中浸泡过的桦褐孔菌粉末与提取溶剂在室温下装入层析柱中，按照常规方法洗脱出桦褐孔菌三萜；(4)循环柱层析提取采用至少三根层析柱依次连续洗脱，上一根层吸柱的洗脱液直接进入下一根层吸柱进行洗脱，直至完成提取；(5)大孔树脂预处理依次用95％酒精、盐酸和NaOH溶液分别浸泡XAD‑2大孔树脂12小时，然后往层析柱中装入XAD‑2大孔树脂，然后以1.5BV/小时的流速用蒸馏水充分洗涤5BV，制成大孔树脂层析柱；(6)大孔树脂层析柱层析纯化使用时先将提取液以1.5BV/小时的流速加入预处理或再生后的大孔树脂层析柱，加样品于大孔树脂层析柱中，加样时柱大孔树脂柱内不得产生气泡、断层；(7)蒸馏水除杂待样品完全流入柱内后，用蒸馏水以2BV/小时流速洗涤树脂柱3BV，洗去大部分杂质，不损失三萜；(8)洗脱用3BV的体积分数为80％的乙醇溶液从大孔树脂层析柱中洗脱三萜，收集洗脱液，洗脱过程中，三萜以暗黄色条带向下移动，可作为层析洗脱时的目测指标，收集三萜洗脱液；(9)静置除杂将收集好的三萜洗脱液密封，避光在低温冷藏箱中放置12小时后减压过滤或离心过滤除去沉淀；(10)减压浓缩取步骤(9)滤液或离心的上清液，在40‑45℃条件下减压浓缩至除去乙醇；(11)干燥取步骤(10)减压浓缩后的浓缩液真空冷冻干燥12小时得亮黄色粉末，即为桦褐孔菌三萜。