[发明专利]一种捕获RNA原位高级结构及相互作用的方法有效
申请号: | 201910384194.2 | 申请日: | 2019-05-09 |
公开(公告)号: | CN111909991B | 公开(公告)日: | 2021-08-03 |
发明(设计)人: | 薛愿超;蔡兆奎;曹唱唱 | 申请(专利权)人: | 中国科学院生物物理研究所 |
主分类号: | C12Q1/6869 | 分类号: | C12Q1/6869 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 张立娜 |
地址: | 100101*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明公开了一种捕获RNA原位高级结构及相互作用的方法。该方法包括:固定细胞或组织中蛋白质介导的RNA相互作用;在保持细胞完整的情况下行膜穿孔;降解游离RNA;在RNA3’末端行pCp‑biotin标记并原位近端连接;细胞消解后纯化含C‑biotin的嵌合体RNA;构建链特异性文库;高通量测序。本发明在不破坏细胞结构、保持细胞完整的情况下,原位处理胞内RNA,捕获生理状态下RNA分子内(间)相互作用;用pCp‑biotin标记RNA末端,非变性条件下原位连接,极大提高标记效率,同时降低分子间非特异连接;用C1磁珠能高效富集标记C‑biotin的嵌合体RNA,增加测序有效数据比例,降低测序成本。 | ||
搜索关键词: | 一种 捕获 rna 原位 高级 结构 相互作用 方法 | ||
【主权项】:
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