[发明专利]一种蛋白包涵体及重组人β-神经生长因子的制备方法有效
| 申请号： | 201910390559.2 | 申请日： | 2019-05-10 |
| 公开（公告）号： | CN110093394B | 公开（公告）日： | 2023-10-03 |
| 发明（设计）人： | 李树刚;张伟;王传胜;邓永康;龚会英;柴新娟;但国平;程丹凝;余英鹏 | 申请（专利权）人： | 重庆科润生物医药研发有限公司 |
| 主分类号： | C12P21/06 | 分类号： | C12P21/06;C07K14/48;C07K1/113;C07K1/16 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 401121 重庆市北部新区高*** | 国省代码： | 重庆;50 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种蛋白包涵体及重组人β‑神经生长因子的制备方法，对含肠激酶酶切位点的重组人β‑神经生长因子前体蛋白的包涵体进行色谱复性，得到复性前体蛋白，即蛋白包涵体；对复性前体蛋白进行肠激酶酶切，得到酶解产物；对酶解产物进行分离纯化。本发明将色谱法应用到rhpro‑NGF包涵体复性中，相比于传统的稀释复性方法，显著提高复性率，缩短复性时间，使后续纯化更简单，获得结构正确高纯度产品，能够减少蛋白质互相聚集的机会，打破复性变性反应平衡，使复性反应持续进行，以较高的蛋白复性浓度进行，便于去除变性剂，集成复性与纯化过程，可以实现自动化、规模化，层析介质可以重复使用，降低工艺成本，更利于将来产业化的大规模生产。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 蛋白 包涵 重组 神经 生长因子 制备 方法 | ||
【主权项】：
1.一种重组人β‑神经生长因子的制备方法，其特征在于，包含以下步骤：步骤(1)对含肠激酶酶切位点的重组人β‑神经生长因子前体蛋白的包涵体进行色谱复性，得到复性前体蛋白；步骤(2)对所述复性前体蛋白进行肠激酶酶切，得到酶解产物；步骤(3)对所述酶解产物进行分离纯化。
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