[发明专利]一种单颗粒水平上的均相免疫分析方法在审
申请号: | 201910396483.4 | 申请日: | 2019-05-14 |
公开(公告)号: | CN110133246A | 公开(公告)日: | 2019-08-16 |
发明(设计)人: | 盖宏伟;张玉苏;刘晓君 | 申请(专利权)人: | 江苏师范大学 |
主分类号: | G01N33/532 | 分类号: | G01N33/532;G01N33/58;G01N21/47;G01N30/02;G01N30/74 |
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地址: | 221000 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 一种单颗粒水平上的均相免疫分析方法,包括,将捕获抗体和检测抗体分别修饰在金纳米颗粒CA‑AuNP和量子点DA‑QD上;将样品加入到CA‑AuNP和DA‑QD混合液中,震荡、孵育一段时间,形成CA‑AuNP‑抗原‑DA‑QD的夹心结构;取制备的溶液滴于载玻片上,将载玻片置于暗场显微镜下成像;照射载玻片一段时间,在照射过程中记录金颗粒的散射强度;夹心结构中的金颗粒与量子点发生等离子共振能量转移,导致金颗粒散射强度降低。没有形成夹心结构的CA‑AuNP散射强度与颗粒数目分布为正态分布,以该正态分布的期望值为基准值;统计低于和高于基准值的金颗粒数目,计算两者比例,以该比例定量抗原浓度。本方法为均相免疫分析,简单快捷,使用样品量少,在单颗粒水平上成像,检测限低、检测灵敏度高。 | ||
搜索关键词: | 金颗粒 夹心结构 免疫分析 单颗粒 载玻片 散射 正态分布 量子点 抗原 成像 照射 暗场显微镜 等离子共振 检测灵敏度 金纳米颗粒 比例定量 捕获抗体 检测抗体 能量转移 强度降低 样品加入 混合液 溶液滴 样品量 孵育 修饰 制备 震荡 检测 记录 统计 | ||
【主权项】:
1.一种单颗粒水平上的均相免疫分析方法,其特征在于,包括以下步骤:S1:将捕获抗体和检测抗体分别修饰在金纳米颗粒CA‑AuNP和量子点DA‑QD上;S2:将样品加入到CA‑AuNP和DA‑QD混合液中,震荡、孵育一段时间,形成CA‑AuNP‑抗原‑DA‑QD的夹心结构;S3:取S2制备的溶液滴于载玻片上,将载玻片置于暗场显微镜下成像;S4:照射载玻片一段时间,在照射过程中记录金颗粒的散射强度;夹心结构中的金颗粒与量子点发生等离子共振能量转移,导致金颗粒散射强度降低;没有形成夹心结构的CA‑AuNP散射强度与颗粒数目分布为正态分布,以该正态分布的期望值为基准值,统计步骤S4中低于和高于基准值的金颗粒数目,计算两者比例;S5:将步骤S4中的低于基准值的金颗粒数量与高于基准值的金颗粒数量之比与抗原浓度关联。
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