[发明专利]一种磷酸钙转染细胞的方法在审
申请号: | 201910407479.3 | 申请日: | 2019-05-15 |
公开(公告)号: | CN110229836A | 公开(公告)日: | 2019-09-13 |
发明(设计)人: | 王小文;胡嘉彪;黄春;蒋迎九;吴庆琛 | 申请(专利权)人: | 重庆医科大学附属第一医院 |
主分类号: | C12N15/63 | 分类号: | C12N15/63 |
代理公司: | 上海光华专利事务所(普通合伙) 31219 | 代理人: | 许亦琳;余明伟 |
地址: | 400016*** | 国省代码: | 重庆;50 |
权利要求书: | 查看更多 | 说明书: | 查看更多 |
摘要: | 本发明涉及一种磷酸钙转染细胞的方法,所述方法至少包括以下步骤:1)将细胞接种于含有培养基的培养容器中贴壁培养,培养至所贴壁的培养容器壁总面积的60%‑70%时即可开始转染,得到待转染的细胞;制备磷酸钙‑质粒DNA沉淀:向质粒中加入Cacl2水溶液,再加入无菌水,混匀,得到混合液一;将与所述混合液一等体积的Cacl2水溶液吹打起泡,得到泡沫混合液二;将所述混合液一加入所述泡沫混合液二中,室温孵育得到混合液三;给所述待转染的细胞更换新鲜培养基,静置;将混合液三加入所述待转染的细胞所在的培养基中,混匀后孵育。本方法提高了转染效率,操作步骤简单、结果可靠、重复性好等特点。 | ||
搜索关键词: | 转染 混合液 磷酸钙 泡沫混合液 混合液三 培养容器 转染细胞 培养基 细胞 混匀 新鲜培养基 起泡 室温孵育 贴壁培养 细胞接种 转染效率 质粒DNA 无菌水 吹打 孵育 贴壁 质粒 制备 沉淀 | ||
【主权项】:
1.一种磷酸钙转染细胞的方法,其特征在于,所述方法至少包括以下步骤:1)将细胞接种于含有培养基的培养容器中贴壁培养,培养至所贴壁的培养容器壁总面积的60%‑70%时即可开始转染,得到待转染的细胞;2)制备磷酸钙‑质粒DNA沉淀:向质粒中加入Cacl2水溶液,再加入无菌水,混匀,得到混合液一;3)将与所述混合液一等体积的Cacl2水溶液吹打起泡,得到泡沫混合液二;4)将所述混合液一加入所述泡沫混合液二中,室温孵育得到混合液三;5)给所述待转染的细胞更换新鲜培养基,静置;6)将混合液三加入所述待转染的细胞所在的培养基中,混匀后孵育。
下载完整专利技术内容需要扣除积分,VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息,商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于重庆医科大学附属第一医院,未经重庆医科大学附属第一医院许可,擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作,请联系【客服】
本文链接:http://www.vipzhuanli.com/patent/201910407479.3/,转载请声明来源钻瓜专利网。