[发明专利]一种磷酸钙转染细胞的方法在审

专利信息
申请号: 201910407479.3 申请日: 2019-05-15
公开(公告)号: CN110229836A 公开(公告)日: 2019-09-13
发明(设计)人: 王小文;胡嘉彪;黄春;蒋迎九;吴庆琛 申请(专利权)人: 重庆医科大学附属第一医院
主分类号: C12N15/63 分类号: C12N15/63
代理公司: 上海光华专利事务所(普通合伙) 31219 代理人: 许亦琳;余明伟
地址: 400016*** 国省代码: 重庆;50
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摘要: 发明涉及一种磷酸钙转染细胞的方法,所述方法至少包括以下步骤:1)将细胞接种于含有培养基的培养容器中贴壁培养,培养至所贴壁的培养容器壁总面积的60%‑70%时即可开始转染,得到待转染的细胞;制备磷酸钙‑质粒DNA沉淀:向质粒中加入Cacl2水溶液,再加入无菌水,混匀,得到混合液一;将与所述混合液一等体积的Cacl2水溶液吹打起泡,得到泡沫混合液二;将所述混合液一加入所述泡沫混合液二中,室温孵育得到混合液三;给所述待转染的细胞更换新鲜培养基,静置;将混合液三加入所述待转染的细胞所在的培养基中,混匀后孵育。本方法提高了转染效率,操作步骤简单、结果可靠、重复性好等特点。
搜索关键词: 转染 混合液 磷酸钙 泡沫混合液 混合液三 培养容器 转染细胞 培养基 细胞 混匀 新鲜培养基 起泡 室温孵育 贴壁培养 细胞接种 转染效率 质粒DNA 无菌水 吹打 孵育 贴壁 质粒 制备 沉淀
【主权项】:
1.一种磷酸钙转染细胞的方法,其特征在于,所述方法至少包括以下步骤:1)将细胞接种于含有培养基的培养容器中贴壁培养,培养至所贴壁的培养容器壁总面积的60%‑70%时即可开始转染,得到待转染的细胞;2)制备磷酸钙‑质粒DNA沉淀:向质粒中加入Cacl2水溶液,再加入无菌水,混匀,得到混合液一;3)将与所述混合液一等体积的Cacl2水溶液吹打起泡,得到泡沫混合液二;4)将所述混合液一加入所述泡沫混合液二中,室温孵育得到混合液三;5)给所述待转染的细胞更换新鲜培养基,静置;6)将混合液三加入所述待转染的细胞所在的培养基中,混匀后孵育。
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