[发明专利]基于电转技术和CRISPR-Cas9技术提高基因定点整合到细胞的方法在审
| 申请号： | 201910413839.0 | 申请日： | 2019-05-17 |
| 公开（公告）号： | CN111944848A | 公开（公告）日： | 2020-11-17 |
| 发明（设计）人： | 王甜 | 申请（专利权）人： | 杭州普科亭生物医药有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/864 | 分类号： | C12N15/864;C12N5/10 |
| 代理公司： | 杭州华知专利事务所(普通合伙) 33235 | 代理人： | 张德宝 |
| 地址： | 310052 浙江省杭州市滨江区长河街道滨*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明公开一种基于电转技术和CRISPR‑Cas9技术提高基因定点整合到细胞的方法，包括：针对某个特异性的肿瘤抗原，设计合成目的基因，并在目的基因两侧合成同源臂；将合成的目的基因及同源臂构建到腺相关病毒载体上，产病毒；合成识别插入位点的guide RNA，表达纯化Cas9蛋白；将guide RNA和Cas9蛋白体外结合后，再与细胞混合，电转，后加入带有目的基因的腺相关病毒，检测目的基因的表达情况以及细胞的功能。本发明是基于电转技术和CRISPR‑Cas9技术提高基因定点整合到细胞的方法，并通过腺相关病毒作为插入基因的载体，可以实现高效率的定点插入效果。 | ||
| 搜索关键词： | 基于 技术 crispr cas9 提高 基因 定点 整合 细胞 方法 | ||
【主权项】：
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