[发明专利]多种脂溶性维生素的含量测定方法

摘要

本发明公开了多种脂溶性维生素的含量测定方法，通过液相质谱法检测血清样本，带入标准曲线得到血清样本中的多种脂溶性维生素的含量。对比现有检测方法，本发明的方法具有多种物质同时检测、高灵敏度、高选择性、可定性、可定量、步骤简单、适用范围广、快速准确的特点。

主权项

1.一种多种脂溶性维生素的含量测定方法，其特征在于：包括以下步骤：（1）标准溶液的制备：分别精密称量5种脂溶性维生素，用50%甲醇水稀释，得到5种维生素的储备液，浓度均为10μg/mL，然后将储备液逐级稀释得到5种脂溶性维生素的标准工作溶液；用甲醇溶解内标化合物，得到内标维生素A‑d₈，25‑羟基维生素D₂‑d₆，25‑羟基维生素D₃‑d₆，维生素E‑d₆，维生素K₁‑d₇的储备液浓度分别为50μg/mL、20μg/mL、20μg/mL、50μg/mL、5μg/mL，然后将内标储备液用甲醇稀释得到内标工作溶液；（2）标准曲线的制备取步骤（1）制备的标准工作溶液100μL，加入200μL的内标工作溶液，涡旋混合1min，加入萃取液1000uL，涡旋混合3min，12000rpm离心10min，取上清液800uL置洁净离心管内，室温氮气吹干，再加入100μL 50%乙腈水溶液复溶，得到脂溶性维生素的校正标样；将校正标样进行液相质谱分析，以待测物/内标峰面积比对待测物浓度进行线性回归，得到标准曲线；（3）待测血清样本的制备：精密吸取血清样品100μL置于洁净的离心管中，加入200μL内标工作溶液，涡旋混合1min，加入萃取液1000uL，涡旋混合3min，12000rpm离心10min，取上清液800uL置洁净离心管内，室温氮气吹干，加入100μL 50%乙腈水溶液复溶，得到待测血清样本；（4）待测血清样本检测：将步骤（3）制备的待测血清样本进行液相质谱检测，检测结果代入步骤（2）所得标准曲线，可以回算出血清样本中脂溶性维生素的浓度。