[发明专利]一种采用二氧化锰修饰的上转换纳米材料检测碱性磷酸酶的方法有效
| 申请号： | 201910427051.5 | 申请日： | 2019-05-22 |
| 公开（公告）号： | CN110082332B | 公开（公告）日： | 2022-06-21 |
| 发明（设计）人： | 李妍;梁美玉;张菲;霍建中;陈文欣;王璐 | 申请（专利权）人： | 天津师范大学 |
| 主分类号： | G01N21/64 | 分类号： | G01N21/64;G01N1/38 |
| 代理公司： | 天津市杰盈专利代理有限公司 12207 | 代理人： | 朱红星 |
| 地址： | 300387 *** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： |
本发明公开了一种用二氧化锰修饰的上转换纳米粒子检测碱性磷酸酶的方法。镱和铥掺杂四氟钇钠(NaYF |
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| 搜索关键词： | 一种 采用 二氧化锰 修饰 转换 纳米 材料 检测 碱性磷酸酶 方法 | ||
【主权项】：
1.一种采用二氧化锰修饰的上转换纳米材料检测癌症标记物碱性磷酸酶的方法，其特征在于按如下步骤进行：（1）0.1 mol/L，25 ℃Tris‑HCl缓冲液的配制：称取1.576 g（Mw=157.6）Tris‑HCl，溶于100 mL高纯水中；用0.5 mol/L氢氧化钠调节溶液的pH=7.4，用高纯水定容在100 mL容量瓶中，低温保存；（2）2‑磷酸‑L‑抗坏血酸(AAP)溶液的配制：称取0.2577 g AAP，溶于8 mL高纯水中，并稀释至4 mM的溶液；（3）碱性磷酸酶溶液的配制：将碱性磷酸酶用碱性磷酸酶缓冲液分别稀释至不同浓度，配制成250 U/L、100 U/L、50 U/L、25 U/L、10 U/L、5 U/L、1 U/L、0.5 U/L、0.1 U/L的溶液；（4）二氧化锰修饰的上转换纳米粒子对碱性磷酸酶的检测：①用移液枪取500 µL2‑磷酸‑L‑抗坏血酸(AAP)溶液和500 µL不同浓度碱性磷酸酶溶液，混合均匀后在37℃中反应15 min‑120 min；②取2 mL二氧化锰修饰的上转换溶液,加入600 µL高纯水，再加入400 µLTris‑HCl（pH=7.4）缓冲溶液，加入1 mL2‑磷酸‑L‑抗坏血酸(AAP)和不同浓度碱性磷酸酶反应产物，混合均匀，反应10‑60 min，用荧光分光光度计检测荧光强度变化值。
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