[发明专利]一种提取黄瓜线粒体及其DNA的有效方法有效
| 申请号： | 201910431970.X | 申请日： | 2019-05-22 |
| 公开（公告）号： | CN110438118B | 公开（公告）日： | 2022-07-05 |
| 发明（设计）人： | 陈劲枫;孟雅;翟于菲;虞夏清 | 申请（专利权）人： | 南京农业大学 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 210095 江苏省*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： |
本发明公开了一种提取黄瓜线粒体及其DNA的方法，属于植物生物技术领域。以黄瓜黄化苗为材料，调整提取过程组织匀浆缓冲液成分和差速离心力组合，结合percoll密度梯度离心分离得到线粒体，并使用3％CTAB裂解线粒体，后续用氯仿‑异戊醇抽提得到高质量mtDNA。最终所提取线粒体完整性好，纯化后mtDNA浓度为158ng·μL |
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| 搜索关键词： | 一种 提取 黄瓜 线粒体 及其 dna 有效 方法 | ||
【主权项】：
1.黄瓜叶片组织破碎：(1)摘取适量预冷的黄化苗叶片，放入1∶6稀释最终浓度1％的消毒液中清洗2分钟，之后置于冰水中清洗3遍；(2)称取上述组织20g置于组织破碎机(JJ‑2，温州标诺仪器有限公司)，加入200mL匀浆缓冲液，同时加入0.28g半胱氨酸，在较低设置下匀浆3次，每次约5秒；(3)匀浆液用8层提前预冷无菌纱布和200目细胞筛依次过滤，并在冰上收集滤液，等量分装于4个无菌的50mL离心管中。
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