[发明专利]一种源自布氏乳杆菌的基因编辑工具及其制备方法和应用在审
| 申请号： | 201910440489.7 | 申请日： | 2019-05-24 |
| 公开（公告）号： | CN110079530A | 公开（公告）日： | 2019-08-02 |
| 发明（设计）人： | 李和刚;张宁;赵金山;辛京京;秦怀远;郝小静 | 申请（专利权）人： | 青岛农业大学 |
| 主分类号： | C12N15/113 | 分类号： | C12N15/113;C12N15/85;C12N15/90 |
| 代理公司： | 北京高沃律师事务所 11569 | 代理人： | 吕纪涛 |
| 地址： | 266000 山*** | 国省代码： | 山东;37 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明提供了一种源自布氏乳杆菌的基因编辑工具及其制备方法和应用，属于基因编辑技术领域，所述源自布氏乳杆菌的基因编辑工具包括pcDNA3.1‑LbCas9质粒和pLbCas9‑sgRNA质粒。所述应用包括以下步骤：确定靶标序列，设计单链寡核苷酸对；退火获得双链DNA片段；连接到pLbCas9‑sgRNA质粒中获得靶标序列sgRNA表达载体；靶标序列sgRNA表达载体与pcDNA3.1‑LbCas9质粒共转染细胞后培养。所述基因编辑工具所识别的3’‑端PAM序列是5’‑NNAAAA‑3’(不同于传统的5’‑NGG‑3’)，扩展了可以编辑的基因位点的范围。 | ||
| 搜索关键词： | 编辑工具 布氏乳杆菌 基因 靶标 质粒 制备方法和应用 表达载体 退火 单链寡核苷酸 双链DNA片段 基因位点 质粒共转 传统的 细胞 应用 | ||
【主权项】：
1.一种源自布氏乳杆菌的基因编辑工具，其特征在于，包括pcDNA3.1‑LbCas9质粒和pLbCas9‑sgRNA质粒；所述pcDNA3.1‑LbCas9质粒包括初始质粒pcDNA3.1(+)和编码LbCas9的DNA片段；所述pLbCas9‑sgRNA质粒包括初始质粒pUC57和sgRNA通用表达框DNA片段；所述源自布氏乳杆菌的基因编辑工具识别的3’‑端PAM序列为5’‑NNAAAA‑3’。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于青岛农业大学，未经青岛农业大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201910440489.7/，转载请声明来源钻瓜专利网。
