[发明专利]一种碱基编辑器及其制备方法和应用有效
| 申请号： | 201910441516.2 | 申请日： | 2019-05-24 |
| 公开（公告）号： | CN110117621B | 公开（公告）日： | 2021-07-16 |
| 发明（设计）人： | 李和刚;张宁;赵金山;秦怀远;辛京京;郝小静 | 申请（专利权）人： | 青岛农业大学 |
| 主分类号： | C12N15/90 | 分类号： | C12N15/90;C12N15/85;C12N15/10 |
| 代理公司： | 北京高沃律师事务所 11569 | 代理人： | 瞿晓晶 |
| 地址： | 266000 山*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种碱基编辑器及其制备方法和应用，属于基因编辑技术领域，所述碱基编辑器包括pCMV‑dCpf1‑RR‑eBE重组质粒和pLbCpf1‑sgRNA重组质粒；所述应用包括以下步骤：确定靶标序列，设计单链寡核苷酸对；退火获得双链DNA片段；连接到pLbCpf1‑sgRNA重组质粒中获得靶位点sgRNA表达载体；靶位点sgRNA表达载体与pCMV‑dCpf1‑RR‑eBE重组质粒共转染细胞后培养；本发明所述碱基编辑器能够特异性的将靶位点的胞嘧啶C突变为胸腺嘧啶T，而对非靶位点的碱基没有任何影响，基因编辑效率在20％～30％之间。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 碱基 编辑器 及其 制备 方法 应用 | ||
【主权项】：
1.一种碱基编辑器，其特征在于，包括pCMV‑dCpf1‑RR‑eBE重组质粒和pLbCpf1‑sgRNA重组质粒；所述pCMV‑dCpf1‑RR‑eBE重组质粒包括载体骨架pCMV‑dCpf1‑eBE和dCpf1‑RR‑eBE表达框DNA片段；所述pLbCpf1‑sgRNA重组质粒包括载体骨架pUC57和sgRNA通用表达框的DNA片段。
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