[发明专利]一种类风湿性关节炎滑膜成纤维细胞的原代培养方法有效

专利信息
申请号: 201910458872.5 申请日: 2019-05-29
公开(公告)号: CN110117570B 公开(公告)日: 2020-03-10
发明(设计)人: 潘继红;王士冠;王林 申请(专利权)人: 山东省医药生物技术研究中心(山东省病毒研究所)
主分类号: C12N5/071 分类号: C12N5/071
代理公司: 济南圣达知识产权代理有限公司 37221 代理人: 郑平
地址: 250062 山东*** 国省代码: 山东;37
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摘要: 发明提供一种类风湿性关节炎滑膜成纤维细胞的原代培养方法,所述方法包括:将经预处理后的滑膜组织充分破碎;向其中加入Ⅲ型胶原酶和Ⅱ型胶原酶并进行吹打;培养消化后打散成单个细胞;过滤后将滤液离心取下层沉淀接种至DMEM高糖培养基中贴壁培养;采用自然纯化法和反复贴壁法纯化细胞即得类风湿性关节炎滑膜成纤维细胞。采用本发明的培养方法30天可获得1010个左右的RASFs,细胞产率大大提高极高,可以满足多种实验需要,因此是一种快速有效的原代RASFS分离培养方法。同时原代培养获得RASFs和体外建系的滑膜细胞系相比,具有更高的研究价值,具有良好的实际应用之前景。
搜索关键词: 一种 类风湿性关节炎 滑膜成 纤维 细胞 培养 方法
【主权项】:
1.一种类风湿性关节炎滑膜成纤维细胞的原代培养方法,所述方法包括:将经预处理后的滑膜组织充分破碎;向其中加入Ⅲ型胶原酶和Ⅱ型胶原酶;培养消化后打散成单个细胞;过滤后将滤液离心取下层沉淀接种至DMEM高糖培养基中贴壁培养;采用自然纯化法和反复贴壁法纯化细胞即得类风湿性关节炎滑膜成纤维细胞。
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