[发明专利]基于葡聚糖的ROS响应的喜树碱聚合物前药的制备方法

摘要

本发明具体是基于葡聚糖的ROS响应的喜树碱聚合物前药的制备并研究其生物应用。合成步骤如下：（1）利用葡聚糖（Dextran）通过两步反应合成星形ATRP引发剂（Dextran‑Br）；（2）利用酯化反应合成疏水性ROS响应的前药CPTMA；（3）利用ATRP聚合反应引入疏水嵌段的CPTMA和亲水嵌段OEGMA。制备出的聚合物前药具有较高胶束稳定性、高药物上载量等优点，在肿瘤环境的过量ROS的响应下，合成的聚合物前药会选择性的释放出喜树碱，能有效克服药物递送系统中疏水性药物的水溶性差、毒副作用大等缺点，从而达到在肿瘤部位的有效积累，进而达到抑制肿瘤的目的。

主权项

1.基于葡聚糖的ROS响应的喜树碱聚合物前药的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）制备基于葡聚糖的星形原子自由基聚合反应ATRP引发剂葡聚糖溴DEX‑Br, 其反应式如下所示，包括以下步骤：a)在1‑12Pa氩气Ar氛围下，将溶于离子液体1‑烯丙基‑3‑甲基氯化咪唑的葡聚糖DEX冷却至0℃，再加入N‑甲基吡咯烷酮NMP与N,N‑二甲基甲酰胺DMF的混合溶液，随后缓慢加入2‑溴异丁酰溴BIBB，冰浴0.5‑2h，然后升至室温25℃并避光反应48h，所得的混合溶液用饱和碳酸氢钠和去离子水洗涤三次来纯化，将有机相在冷的正己烷中结晶，在温度为25‑30℃的真空干燥箱里烘干，b)接着再将所得淡黄色中间产物溶于NMP中，在冰浴条件下，缓慢向其中加入BIBB，然后升至室温25℃并避光反应24‑72h，接着用饱和碳酸氢钠和去离子水洗涤三次来进行纯化，用丙酮溶解所得沉淀，重复提纯三次得到淡黄色粉末，真空条件下25‑30℃烘干，得到产物DEX‑Br；（2）制备ROS敏感的单体CPTMA，其反应式如下所示，包括以下步骤：首先，将甲基丙烯酸羟乙酯HEMA溶于无水二氯甲烷中，然后将溶解在无水二氯甲烷中的草酸逐渐滴加至上述溶液中，反应在冰浴条件下进行0.5‑1h，中间产物通过旋转蒸发纯化，接下来，将喜树碱溶解于无水二氯甲烷中，向其中加入三乙胺TEA，然后将上步中间产物溶于二氯甲烷中，在冰浴条件下加入反应液中，反应在0℃下进行0.5‑1h，产物通过真空蒸馏和硅胶柱色谱纯化，最终获得黄色固体CPTMA；（3）制备两亲性星形聚合前药DCPT，其反应式如下所示，包括以下步骤：在室温25℃和1‑12Pa氩气Ar氛围条件下，将步骤（1）得到的DEX‑Br，步骤（2）得到的CPTMA和乙二醇甲基丙烯酸酯OEGMA、CuBr溶解在DMF和DMSO的混合溶剂中，冷冻‑解冻循环三次，加入配体Me₆TREN，再冷冻‑解冻循环两次，在25℃下反应12‑48h，得到的产物用乙醚沉淀三次来纯化，将产物放置于25℃烘箱中烘干，得到固体产物DCPT；其中DCPT中m值范围为20‑100，x值的范围为1～80，m值可为2～9，聚合度n值的范围为1～50，得到的聚合物其分子量范围为15600～28900g·mol^‑1；（4）制备ROS敏感型两亲性球状纳米胶束，包括以下步骤：在室温25℃，取一定量步骤（3）得到的DCPT前药材料溶于1mL DMSO中，避光搅拌5～120min在搅拌下缓慢滴加到一定量的水中，搅拌5～60min，然后将溶液分散到一定量的去离子水中，用水透析除去DMSO得到ROS敏感型两亲性球状纳米胶束水溶液。