[发明专利]一种高纯血清白蛋白的制备方法

摘要

一种高纯血清白蛋白的制备方法，通过离子交换层析和亲和层析技术，分别对初步纯化的血清白蛋白进一步通过层析纯化获得高纯度的白蛋白溶液，并经过经典的巴氏消毒法灭活病毒处理；为应用提供更为可靠的安全保障；血清是在全血的凝集过程中，血液中的大部分凝血因子和纤维蛋白原被活化，进而形成凝集物，经过离心分离后得到的淡黄色液体成分；与血浆相比血液凝集后析出的血清中已经去除了凝血因子、纤维蛋白原等多数的其他蛋白质成分，为血清白蛋白的纯化提供了有益的帮助，克服了低温乙醇法工艺步骤复杂、操作条件要求高、操作环境恶劣、设备投入巨大和高耗能等不足，同时也避免了乙醇沉淀过程中多聚体蛋白的产生，能够极大地提高制品的质量。

主权项

1.一种高纯血清白蛋白的制备方法，其特征在于：所述方法采用血清为原料，采用盐析酸沉淀分离法对血清进行粗纯化，获得粗纯化后的血清白蛋白，粗纯化后的血清白蛋白进行层析分离获得高纯血清白蛋白；所述粗纯化后的步骤具体包括：第一步、粗纯化血清白蛋白溶液更换为血清白蛋白层析缓冲液：所述缓冲液换液方法，具体为将粗纯化后的血清白蛋白溶液用截留分子量为10kDa的超滤膜进行超滤换液，更换为离子交换层析上样缓冲液或亲和层析上样缓冲液，层析缓冲液换液量为5‑20个血清白蛋白溶液体积，换液完成后获得含有血清白蛋白的离子交换层析上样溶液或亲和层析上样溶液；第二步、对含有血清白蛋白的离子交换层析上样溶液或亲和层析上样溶液进行层析分离，根据紫外吸收峰收集洗脱液(含有纯化的血清白蛋白)，并更换为血清白蛋白保存缓冲液；第三步、血清白蛋白的病毒灭活，向纯化的血清白蛋白中加入白蛋白稳定剂‑辛酸钠，进行巴氏消毒法灭活病毒处理，即为制备的高纯度血清白蛋白；所述辛酸钠的添加量为0.16～0.18mmol/g蛋白质；将添加了辛酸钠的层析纯化的白蛋白溶液装于密封容器中，放入60±1℃的水浴中，保温灭活处理10h，即为灭活了病毒的高纯血清白蛋白。