[发明专利]一种树状大分子包裹纳米金颗粒探针及其制备和应用

摘要

本发明涉及一种树状大分子包裹纳米金颗粒探针及其制备和应用。该制备方法包括：G5.NH2‑PEG‑OH制备，{(Au0)25‑G5.NH2‑(PEG‑OH)14}DENPs制备，{(Au0)25‑G5.NHAc‑(PEG‑OH)14}DENPs制备，{(Au0)25‑G5.NHAc‑(PEG)14‑(Fluo‑4)2}DENPs制备。该方法简单，易于操作分离，原料来源商品化，具有良好的发展前景；得到的树状大分子包裹纳米金颗粒探针具有良好的水溶性和稳定性，在对T细胞进行状态监测的同时可以通过CT成像对T细胞进行追踪，具有双模态成像效果。

主权项

1.一种树状大分子包裹纳米金颗粒探针的制备方法，包括：(1)将MAL‑PEG‑OH溶于超纯水中，得到浓度为8‑12mg/mL的MAL‑PEG‑OH溶液，逐滴加入G5.NH₂水溶液中反应，透析纯化，冷冻干燥，得到聚乙二醇化的树状大分子G5.NH₂‑PEG‑OH，其中G5.NH₂和MAL‑PEG‑OH的摩尔比为1：20；(2)将步骤(1)中G5.NH₂‑PEG‑OH溶解于超纯水中，得到浓度为8‑12mg/mL的G5.NH₂‑PEG‑OH溶液，滴加氯金酸水溶液，搅拌均匀，加入硼氢化钠水溶液，还原反应，透析纯化，冷冻干燥，得到树状大分子包裹纳米金颗粒{(Au⁰)₂₅‑G5.NH₂‑(PEG‑OH)₁₄}DENPs，其中G5.NH₂‑PEG‑OH、氯金酸与硼氢化钠的摩尔比为1:25:122‑128；(3)将步骤(2)中{(Au⁰)₂₅‑G5.NH₂‑(PEG‑OH)₁₄}DENPs溶解于超纯水中，得到浓度为8‑12mg/mL的DENPs溶液，加入三乙胺溶液，搅拌均匀，然后滴加乙酸酐溶液，搅拌过夜，透析纯化，冻干燥，得到乙酰化树状大分子包裹纳米金颗粒{(Au⁰)₂₅‑G5.NHAc‑(PEG‑OH)₁₄}DENPs，其中{(Au⁰)₂₅‑G5.NH₂‑(PEG‑OH)₁₄}DENPs、三乙胺和乙酸酐的摩尔比为1:100:100～1:120:100；(4)将Fluo‑4溶解在溶剂中，得到浓度为0.8‑1.2mg/mL的Fluo‑4溶液，避光，经EDC活化，加入步骤(3)中{(Au⁰)₂₅‑G5.NHAc‑(PEG‑OH)₁₄}DENPs的溶液，搅拌均匀，加入DMAP溶液，酯化反应，透析纯化，冷冻干燥，得到树状大分子包裹纳米金颗粒探针{(Au⁰)₂₅‑G5.NHAc‑(PEG)₁₄‑(Fluo‑4)₂}DENPs，其中{(Au⁰)₂₅‑G5.NHAc‑(PEG‑OH)₁₄}DENPs、Fluo‑4、EDC和DMAP的摩尔比为1:3.5:7‑10:0.7‑1.2。