[发明专利]CRISPR/Cas9系统介导的山羊KRTAP13-1基因敲除的方法在审
| 申请号： | 201910495313.1 | 申请日： | 2019-06-11 |
| 公开（公告）号： | CN110172478A | 公开（公告）日： | 2019-08-27 |
| 发明（设计）人： | 刘东军;高源;郝斐;呼啸;多磊 | 申请（专利权）人： | 内蒙古大学 |
| 主分类号： | C12N15/85 | 分类号： | C12N15/85;C12N15/90;C12N5/10;C12N15/877;A01K67/027 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 010021 内蒙古自*** | 国省代码： | 内蒙古;15 |
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| 摘要： | 本发明利用CRISPR/Cas9系统介导完成山羊KRTAP13‑1基因定点敲除，本研究依据山羊的KRTAP13‑1基因序列，构建基于CRISPER/Cas9系统的Cas9/gRNA打靶载体；然后将优化后的Cas9/gRNA共表达敲除载体转染至山羊胎儿成纤维细胞中，获得KRTAP13‑1基因定点敲除的细胞株。本发明所构建的基于CRISPER/Cas9系统的敲除载体为山羊KRTAP13‑1基因定点敲除提供了一种简单快捷安全的途径。该方法在细胞株筛选过程中没有涉及任何筛选标记基因，从而大大提高了转基因动物的安全性，对山羊的基因功能以及遗传育种的研究具有重要价值。 | ||
| 搜索关键词： | 山羊 敲除 基因定点 细胞株 构建 介导 胎儿成纤维细胞 筛选标记基因 转基因动物 打靶载体 基因功能 基因敲除 基因序列 遗传育种 共表达 转染 筛选 研究 优化 安全 | ||
【主权项】：
1.CRISPR/Cas9系统引导的山羊KRTAP13‑1基因定点敲除的方法，其特征在于，其是根据山羊的KRTAP13‑1基因序列，构建基于CRISPER/Cas9系统的Cas9/gRNA共表达敲除载体，然后将优化后的Cas9/gRNA共表达敲除载体转染至山羊胎儿成纤维细胞中，获得KRTAP13‑1基因定点敲除的细胞株。
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