[发明专利]一种猪圆环病毒Ⅲ型病毒样颗粒及其制备方法

摘要

本发明实施例公开了一种猪圆环病毒Ⅲ型病毒样颗粒，所述病毒样颗粒的制备方法包括扩增猪圆环Ⅲ型Cap蛋白基因，并利用所述基因构建重组穿梭质粒pFB‑Cap，利用所述重组穿梭质粒pFB‑Cap构建rB‑Cap重组杆粒，将所述rB‑Cap重组杆粒转染SF9细胞，得到表达猪圆环病毒Ⅲ型Cap基因的重组杆状病毒rBV‑PCV3 Cap，将所述重组杆状病毒rBV‑PCV3 Cap感染High Five细胞，纯化，得到猪圆环病毒Ⅲ型病毒样颗粒PCV3 VLP过程；其中，所述Cap蛋白基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明实施例基于杆状病毒‑昆虫细胞表达系统，使用无血清悬浮培养的High Five细胞表达制备，结合蔗糖垫超速离心和蔗糖密度梯度离心纯化获得PCV3病毒样颗粒。本发明实施例的病毒样颗粒免疫原性好，安全性高，具有良好的开发与应用前景。

主权项

1.一种猪圆环病毒Ⅲ型病毒样颗粒，所述病毒样颗粒颗粒的制备方法包括扩增猪圆环Ⅲ型Cap蛋白基因，并利用所述基因构建重组穿梭质粒pFB‑Cap，利用所述重组穿梭质粒pFB‑Cap构建rB‑Cap重组杆粒，将所述rB‑Cap重组杆粒转染SF9细胞，得到表达猪圆环病毒Ⅲ型Cap蛋白的重组杆状病毒rBV‑PCV3 Cap，将所述重组杆状病毒rBV‑PCV3 Cap感染High Five细胞，纯化，得到猪圆环病毒Ⅲ型病毒样颗粒PCV3 VLP过程；其中，所述Cap蛋白基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。