[发明专利]一种香蕉水通道蛋白基因启动子转录因子的筛选方法在审
| 申请号： | 201910521135.5 | 申请日： | 2019-06-17 |
| 公开（公告）号： | CN110229930A | 公开（公告）日： | 2019-09-13 |
| 发明（设计）人： | 许奕;宋顺;李敬阳;金志强;徐碧玉;王安邦;李羽佳;黄东梅;魏卿 | 申请（专利权）人： | 中国热带农业科学院海口实验站;中国热带农业科学院热带生物技术研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/6897 | 分类号： | C12Q1/6897;C40B30/04 |
| 代理公司： | 重庆百润洪知识产权代理有限公司 50219 | 代理人： | 刘立春 |
| 地址： | 570100 *** | 国省代码： | 海南;46 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明公开了一种香蕉水通道蛋白基因启动子转录因子的筛选方法，包括以下步骤，判断启动子的核心区域，根据香蕉A基因组设计启动子的引物进行扩增，扩增长度为1362bp，通过plantcare和PLACE分析其顺式作用元件，进行启动子GUS活性的检测，通过染色情况来判断启动子的核心区域B，酵母单杂交筛选与启动子互作的转录因子，用酵母单杂交的方法进行验证，将启动子核心区域B作为诱饵区段构建诱饵载体，筛选酵母干旱处理的香蕉单杂交文库。本发明鉴定出在干旱胁迫条件下，与MaPIP1；1启动子直接结合的转录因子，更加方便对香蕉水通道蛋白基因的研究,有助于提升转基因香蕉的抗旱能力，有助于进一步理解MaPIP1；1的抗旱机制。 | ||
| 搜索关键词： | 启动子 转录因子 核心区域 通道蛋白 香蕉水 筛选 基因启动子 酵母单杂交 香蕉 干旱胁迫条件 顺式作用元件 转基因香蕉 干旱处理 抗旱能力 区段构建 诱饵载体 直接结合 单杂交 染色 酵母 扩增 文库 引物 诱饵 抗旱 验证 基因 检测 分析 研究 | ||
【主权项】：
1.一种香蕉水通道蛋白基因启动子转录因子的筛选方法，其特征在于，包括以下步骤：S1：判断启动子的核心区域，根据香蕉A基因组设计启动子的引物进行扩增，扩增长度为1362bp，通过plantcare和PLACE分析其顺式作用元件，进行启动子GUS活性的检测，通过染色情况来判断启动子的核心区域B；S2：酵母单杂交筛选与启动子互作的转录因子，用酵母单杂交的方法进行验证，将启动子核心区域B作为诱饵区段构建诱饵载体，筛选酵母干旱处理的香蕉单杂交文库，确定与核心区域B序列相互作用的结合蛋白，获取转率因子C信息；S3：进一步验证转率因子C与核心区域B的相互作用，qRT‑PCR检测干旱胁迫处理下的结合蛋白，获取能够能够协同核心区域B基因响应干旱胁迫的结合蛋白D；S4：进一步证明转率因子C与核心区域B的启动子区域结合，进行体外互作验证，进行了双荧光素酶的测定。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于中国热带农业科学院海口实验站;中国热带农业科学院热带生物技术研究所，未经中国热带农业科学院海口实验站;中国热带农业科学院热带生物技术研究所许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201910521135.5/，转载请声明来源钻瓜专利网。
