[发明专利]一种利用内质网滞留信号肽提高酵母细胞表面展示Fab片段抗原结合能力的重组载体有效
| 申请号： | 201910523234.7 | 申请日： | 2019-06-17 |
| 公开（公告）号： | CN110218737B | 公开（公告）日： | 2022-12-23 |
| 发明（设计）人： | 易犁;梅萌;李俊红;汪声晨;张桂敏 | 申请（专利权）人： | 湖北大学 |
| 主分类号： | C12N15/81 | 分类号： | C12N15/81;C12N15/66;C12N15/62;C12R1/865 |
| 代理公司： | 北京精金石知识产权代理有限公司 11470 | 代理人： | 强红刚 |
| 地址： | 430062 湖北*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种利用酵母内质网滞留信号肽提高酵母细胞表面展示Fab片段抗原结合能力的重组载体，属于抗体工程技术领域。本发明利用GAL1‑GAL10双向启动子载体同时表达Adalimumab或Infliximab的VH‑CH1和VL‑CL两个结构域，通过氨基端内质网定位信号肽定位在内质网内组装成天然Fab形式片段，再利用Aga1‑Aga2酵母细胞展示系统展示到细胞表面。同时，通过将酿酒酵母内质网滞留信号肽融合到Fab片段VL‑CL结构域的羧基端，明显提高了酵母细胞表面展示的Fab片段结合抗原的能力，促进了功能性Fab片段的展示，从而更适用于Fab片段的酵母细胞表面展示，为抗体工程中Fab的改造方法提供了一种优化策略。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 利用 内质网 滞留 信号肽 提高 酵母 细胞 表面 展示 fab 片段 抗原 结合 能力 | ||
【主权项】：
1.一种利用内质网滞留信号肽提高酵母细胞表面展示Fab片段抗原结合能力的重组载体，其特征在于，该重组载体的结构为pESD‑ERS‑HA‑CL‑VL‑GAL1‑GAL10‑VH‑CH1‑FLAG‑Aga2，所述的ERS为内质网滞留信号肽，所述的HA或FLAG为荧光抗体标签，所述的GAL1‑GAL10为控制Fab两条链表达的双向启动子，所述的Aga2为酵母细胞表面展示蛋白。
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