[发明专利]一种EB66细胞株悬浮生长无血清化学成分界定培养基及其制备方法在审
| 申请号： | 201910551879.1 | 申请日： | 2019-06-25 |
| 公开（公告）号： | CN110317778A | 公开（公告）日： | 2019-10-11 |
| 发明（设计）人： | 蔡仕君;陈瑞爱;罗顺;李延鹏;沈永义;黄梅;叶俊贤;王嘉琪;温良海;罗琼 | 申请（专利权）人： | 华农（肇庆）生物产业技术研究院有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/0735 | 分类号： | C12N5/0735;C12N5/02 |
| 代理公司： | 广州市科丰知识产权代理事务所(普通合伙) 44467 | 代理人： | 龚元元 |
| 地址： | 526060 广东省肇庆市高新区创业路5*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明属于培养基领域，具体为一种EB66细胞株悬浮生长无血清化学成分界定培养基，添加剂A中各物质在所述培养基中浓度为：胰岛素1‑10mg/L；IGF‑1 5‑10μg/L；腐胺0.5‑2mg；谷胱甘肽0.5‑5mg/L；乙醇胺1‑5mg/L；β‑巯基乙醇10‑50μM；卵磷脂1‑5mg/L；维生素C 10‑50mg/L；牛磺酸50‑100mg/L；胆固醇2‑5mg/L；谷氨酰胺3‑6mM；每1L培养基中所述氨基酸混合组分添加量为1000mg‑3000mg。该培养基支持EB66细胞在无血清、全悬浮的条件下快速增殖，倍增时间短。细胞呈现较高密度，同时，本发明还提供该培养基的制备方法。 | ||
| 搜索关键词： | 培养基 无血清 细胞株 界定 制备 悬浮 卵磷脂 细胞 谷氨酰胺 谷胱甘肽 快速增殖 巯基乙醇 添加剂A 维生素C 胆固醇 牛磺酸 全悬浮 添加量 胰岛素 乙醇胺 生长 氨基酸 腐胺 倍增 | ||
【主权项】：
1.一种EB66细胞株悬浮生长无血清化学成分界定培养基，其特征在于，所述培养基为以DMEM：F12＝1:1的DMEM/F12培养基为基础培养基添加氨基酸混合组分、添加剂A、PF‑68、葡萄糖得到，添加剂A中各物质在所述培养基中浓度为：胰岛素1‑10mg/L；IGF‑1 5‑10μg/L；腐胺0.5‑2mg；谷胱甘肽0.5‑5mg/L；乙醇胺1‑5mg/L；β‑巯基乙醇10‑50μM；卵磷脂1‑5mg/L；维生素C 10‑50mg/L；牛磺酸50‑100mg/L；胆固醇2‑5mg/L；谷氨酰胺3‑6mM；每1L培养基中所述氨基酸混合组分添加量为1000mg‑3000mg；所述氨基酸混合组分不含谷氨酰胺且各氨基酸比例与基础培养基中各氨基酸比例相同；培养基中PF‑68的浓度为1000mg/L；葡萄糖浓度为3000‑5000mg/L。
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