[发明专利]一种利用异柠檬酸脱氢酶2评价低剂量伽马射线辐照生物损伤的方法

摘要

本发明涉及一种利用异柠檬酸脱氢酶2评价低剂量伽马射线辐照生物损伤的方法。根据C57BL/6J小鼠接受的低剂量伽马射线辐照剂量与血清中IDH2的相对表达量的下调率的剂量‑效应关系，C57BL/6J小鼠血清中IDH2的相对表达量的下调率，评估低剂量伽马射线辐照的生物损伤。在建立低剂量率辐照C57BL/6J小鼠模型的基础上，用iTRAQ技术筛选出有意义的差异表达蛋白，并用Western blot进行验证。本方法具有对低剂量辐射敏感、可靠性高、特异性强等多重优点。

主权项

1.一种利用异柠檬酸脱氢酶2评价低剂量伽马射线辐照生物损伤的方法，利用C57BL/6J小鼠血清中异柠檬酸脱氢酶2对低剂量伽马射线辐照非常敏感的特性，根据小鼠接受的低剂量伽马射线辐照剂量与血清中IDH2的相对表达量的下调率的剂量‑效应关系，小鼠血清中异柠檬酸脱氢酶2的相对表达量的下调率，评估低剂量伽马射线辐照的生物损伤，其特征在于，具体步骤包括：（1）建立低剂量辐照小鼠模型；（2）采集血清；（3）异柠檬酸脱氢酶2相对表达量下调率的检测；（4）辐照损伤综合评价；所述建立低剂量辐照小鼠模型具体为：选取6周到7周的雄性小鼠，分组，对照组小鼠放在无伽马射线辐照的环境中饲养，实验组小鼠分别放在剂量率为12.5、25.0和50.0 μGy/h的伽马射线辐照环境中饲养，总辐照时间为90 d，每天辐照8 h；所述的采集血清具体方法为：采用摘眼球法取血，采集的血液放置于4^oC冰箱静置过夜，隔天3000 r/min离心20 min分离血清；所述的异柠檬酸脱氢酶2的相对表达量下调率的检测具体方法为：将收集的接受过低剂量伽马射线辐照的小鼠血清进行蛋白提取、总蛋白浓度测定、蛋白质变性、凝胶电泳、转膜、免疫反应、化学发光反应、凝胶成像扫描分析、最后进行异柠檬酸脱氢酶2的相对表达量下调率分析。