[发明专利]重组人白细胞介素-12脂质体的制备方法及其产品用途

摘要

本发明属于脂质体制备技术领域，具体涉及重组人白细胞介素‑12脂质体的制备方法及获得产品的用途。本发明将重组人白细胞介素‑12加入大豆卵磷脂和胆固醇等物质中制成重组人白细胞介素‑12脂质体，经脂质体包封后的重组人白细胞介素‑12应用于护肤品中可以较快进入皮肤深层，经皮肤吸收后可以很好的发挥其抗过敏、增强免疫、修复光损伤的作用，维持了表皮肌肤不受损伤，避免或减少表皮基底层色素细胞中酪氨酸氧化酶被激活，从而减少酪氨酸激活后生成的黑色素转移到皮肤全层，同时还可以减少水分的蒸发，从而达到美白、保湿、防皱、除瘢的作用，为重组人白细胞介素‑12进入高端化妆品展示了良好的应用前景。

主权项

1.一种重组人白细胞介素‑12脂质体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：S1将稳定表达重组人白介素‑12的CHO细胞经生物反应器进行流加培养，取培养上清液分别经弱阳离子交换层析，肝素亲和层析分离，得重组人白介素‑12；S2取大豆卵磷脂、胆固醇溶于三氯甲烷中，超声处理8～12min，得混合液I；S3往步骤S2得到的混合液I中加入乙醚和三氯甲烷，滴加pH为6.8的PBS缓冲液，超声处理至不分层，得W/O型乳液；S4将步骤S3得到的W/O型乳液于50℃恒温水浴条件下减压蒸发，得O/W型乳液；S5将步骤S4得到的O/W型乳液进行高压均质15～25min，每5min为1个循环，过滤，加入步骤S1收集得到的重组人白介素‑12所述重组人白介素‑12的添加量为70‑100ug/ml，接着加入蛋白质保护剂，在37℃的条件下孵育18～22min，加入附形剂混合分装，于‑40℃预冻2h，在抽真空的条件下冷冻干燥24h，于4℃保存，即得。