[发明专利]一种亲水性短肽的纯化方法

摘要

本发明公开了一种亲水性短肽的纯化方法，包括去除三氟乙酸、凝胶色谱脱盐和离子交换树脂吸附及洗脱收集的步骤；所述去除三氟乙酸的步骤包括将切割亲水性短肽的三氟乙酸溶液加水冻干，以及加入碱进行中和；所述凝胶色谱脱盐和换盐包括中和后的多肽溶液上样、洗脱、收集；所述离子交换色谱纯化亲水性短肽的步骤包括将所述短肽溶液吸附到阳离子树脂，吸附，洗脱收集洗脱液，检测。其亲水性短肽容易析出，在反相色谱中保留能力强，纯化后的纯度高。

主权项

1.一种亲水性短肽的纯化方法，其特征在于，包括以下步骤：S1，切割液后处理：a.在无法析出亲水性短肽的三氟乙酸切割液中，加入0.1～10倍体积的水，液氮预冻后上冻干机，直至冻干瓶中出现固体；b.而后加入适量的0.1％三乙胺溶液调节pH到5～7，获得中和后的多肽溶液。S2，凝胶色谱脱盐换盐：c.将多肽溶液上样到凝胶柱中，总上样量为1～10倍凝胶柱的体积；d.选用1～5倍凝胶柱体积的无盐水或pH为4～5的0.1％醋酸‑乙酸铵作为洗脱液进行洗脱冲洗；e.洗脱后收集各组分，质谱确认目标峰后作为凝胶柱收集液。S3，离子交换色谱纯化：f.将阳离子树脂置入交换柱中，先用水浸洗，直至浸洗水不带颜色和泡沫；g.选用4～5％的HCl和NaOH在交换柱中依次交替浸泡2～4小时，浸泡后，分别用水冲洗至流出水的pH呈中性为止；h.最后用4～5％的HCl将树脂改变为H⁺型；i.将凝胶柱收集液加入到交换柱中，依次用0、0.1、0.2、0.5M氯化钠溶液洗脱，收集洗脱液，即为纯化后的多肽。