[发明专利]一种肿瘤细胞表面标志分子PD-L1的检测方法在审
| 申请号： | 201910601477.8 | 申请日： | 2019-07-04 |
| 公开（公告）号： | CN110361536A | 公开（公告）日： | 2019-10-22 |
| 发明（设计）人： | 颜菁;相鸿坤 | 申请（专利权）人： | 昆山汇先医药技术有限公司 |
| 主分类号： | G01N33/68 | 分类号： | G01N33/68;G01N33/574 |
| 代理公司： | 苏州创元专利商标事务所有限公司 32103 | 代理人： | 李萍 |
| 地址： | 215301 江苏省苏州市*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种肿瘤细胞表面标志分子PD‑L1的检测方法，其提高了检测的准确性。一种肿瘤细胞表面标志分子PD‑L1的检测方法，包括如下步骤：A、提供捕获筛，所述捕获筛包括网状基体及孵育形成在所述网状基体上的EpCAM抗体；B、使分离自体液的有核细胞流过所述捕获筛，以使有核细胞中的肿瘤细胞结合至所述捕获筛上；C、用甲醛将捕获的肿瘤细胞固定在所述捕获筛上；D、依次采用PD‑L1一抗溶液、标记有荧光基团AlexaFluor 647的PD‑L1二抗溶液、pan‑CK‑AlexaFluor488一抗溶液、CD45一抗溶液及标记有荧光基团AlexaFluor 568的CD45二抗溶液对所述捕获筛上固定的细胞进行孵育，然后用细胞核荧光染料标记出所述捕获筛上的所有细胞。 | ||
| 搜索关键词： | 捕获 肿瘤细胞表面 标志分子 一抗 检测 网状基体 荧光基团 肿瘤细胞 核细胞 二抗 孵育 荧光染料标记 细胞核 细胞 固定的 体液 甲醛 | ||
【主权项】：
1.一种肿瘤细胞表面标志分子PD‑L1的检测方法，其特征在于，包括如下步骤：A、提供捕获筛，所述捕获筛包括网状基体及孵育形成在所述网状基体上的EpCAM抗体；B、使分离自体液的有核细胞流过所述捕获筛，以使有核细胞中的肿瘤细胞结合至所述捕获筛上；C、用甲醛将捕获的肿瘤细胞固定在所述捕获筛上；D、依次采用PD‑L1一抗溶液、标记有荧光基团AlexaFluor 647的PD‑L1二抗溶液、pan‑CK‑AlexaFluor 488一抗溶液、CD45一抗溶液及标记有荧光基团AlexaFluor 568的二抗溶液对所述捕获筛上固定的细胞进行孵育，然后用细胞核荧光染料标记出所述捕获筛上的所有细胞。
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