[发明专利]GLUT4基因敲除的sgRNA、A549细胞系及其构建方法有效
申请号: | 201910614661.6 | 申请日: | 2019-07-09 |
公开(公告)号: | CN110408616B | 公开(公告)日: | 2021-06-15 |
发明(设计)人: | 赵平;刘佳;张颖 | 申请(专利权)人: | 中南民族大学 |
主分类号: | C12N15/113 | 分类号: | C12N15/113;C12N15/85;C12N15/90;C12N9/22;C12N5/10;C12Q1/02;C12Q1/6869 |
代理公司: | 武汉智嘉联合知识产权代理事务所(普通合伙) 42231 | 代理人: | 江慧 |
地址: | 430070 湖北*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | 本发明提供了一种GLUT4基因敲除的sgRNA、A549细胞系及其构建方法。本发明提供的GLUT4基因敲除的sgRNA,在GLUT4基因上的靶序列位于其3号外显子上,靶序列如SEQ ID NO:1所示;本发明还提供了GLUT4基因敲除的A549细胞系以及构建方法,以表达载体pX458‑GLUT4作为GLUT4基因的打靶载体,转染A549细胞,获得GLUT4基因敲除的单克隆细胞株;本发明利用CRISPR/Cas9系统从A549细胞中敲除GLUT4基因,从基因和蛋白水平的检测都证实,GLUT4已被成功敲除,为研究GLUT4基因表达缺失对A549细胞葡糖糖摄取及细胞功能上的提供了理想的细胞模型。 | ||
搜索关键词: | glut4 基因 sgrna a549 细胞系 及其 构建 方法 | ||
【主权项】:
1.一种GLUT4基因敲除的sgRNA,其特征在于,所述sgRNA基于CRISPR/CAS9系统,且所述sgRNA在GLUT4基因上的靶序列位于其3号外显子上,靶序列如SEQ ID NO:1所示。
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