[发明专利]GLUT4基因敲除的sgRNA、A549细胞系及其构建方法有效

专利信息
申请号: 201910614661.6 申请日: 2019-07-09
公开(公告)号: CN110408616B 公开(公告)日: 2021-06-15
发明(设计)人: 赵平;刘佳;张颖 申请(专利权)人: 中南民族大学
主分类号: C12N15/113 分类号: C12N15/113;C12N15/85;C12N15/90;C12N9/22;C12N5/10;C12Q1/02;C12Q1/6869
代理公司: 武汉智嘉联合知识产权代理事务所(普通合伙) 42231 代理人: 江慧
地址: 430070 湖北*** 国省代码: 湖北;42
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摘要: 发明提供了一种GLUT4基因敲除的sgRNA、A549细胞系及其构建方法。本发明提供的GLUT4基因敲除的sgRNA,在GLUT4基因上的靶序列位于其3号外显子上,靶序列如SEQ ID NO:1所示;本发明还提供了GLUT4基因敲除的A549细胞系以及构建方法,以表达载体pX458‑GLUT4作为GLUT4基因的打靶载体,转染A549细胞,获得GLUT4基因敲除的单克隆细胞株;本发明利用CRISPR/Cas9系统从A549细胞中敲除GLUT4基因,从基因和蛋白水平的检测都证实,GLUT4已被成功敲除,为研究GLUT4基因表达缺失对A549细胞葡糖糖摄取及细胞功能上的提供了理想的细胞模型。
搜索关键词: glut4 基因 sgrna a549 细胞系 及其 构建 方法
【主权项】:
1.一种GLUT4基因敲除的sgRNA,其特征在于,所述sgRNA基于CRISPR/CAS9系统,且所述sgRNA在GLUT4基因上的靶序列位于其3号外显子上,靶序列如SEQ ID NO:1所示。
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