[发明专利]同时检测血液中维生素K1和维生素K2(MK4)方法在审

专利信息
申请号: 201910630170.0 申请日: 2019-07-12
公开(公告)号: CN110208437A 公开(公告)日: 2019-09-06
发明(设计)人: 许丽;雒琴;贾永娟;倪君君 申请(专利权)人: 北京和合医学诊断技术股份有限公司
主分类号: G01N30/02 分类号: G01N30/02;G01N30/72;G01N30/04;G01N30/06;G01N30/86;G01N30/88
代理公司: 济南信达专利事务所有限公司 37100 代理人: 李世喆
地址: 101111 北京市北京经济技术开发区经*** 国省代码: 北京;11
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摘要: 发明提供了一种同时检测血液中维生素K1和维生素K2(MK4)的方法,该方法包括:利用高效液相串联质谱仪,分别检测至少三种浓度具有内标物的维生素K1和维生素K2(MK4)混合标准溶液,拟合标准曲线方程;向具有已知浓度内标物的混合内标溶液中,添加待检测样品离心后的第一上清液和沉淀蛋白试剂,并添加萃取剂,混匀,高速离心,取第二上清液;通过氮吹方式,吹干第二上清液,复溶液溶解吹干后的剩余物,高速离心,取第三上清液;利用高效液相串联质谱仪,检测第三上清液;基于检测结果和标准曲线方程,得到待检测样品中维生素K1和维生素K2(MK4)的浓度。本发明提供的方案实现了同时检测维生素K1和维生素K2(MK4)。
搜索关键词: 维生素 上清液 检测 标准曲线方程 待检测样品 高速离心 高效液相 内标物 质谱仪 吹干 串联 混合标准溶液 混合内标溶液 血液 沉淀蛋白 检测结果 复溶液 剩余物 萃取剂 氮吹 混匀 拟合 溶解
【主权项】:
1.同时检测血液中维生素K1和维生素K2(MK4)的方法,其特征在于,包括:利用高效液相串联质谱仪,分别检测至少三种浓度混合标准溶液,其中,所述混合标准溶液为具有内标物的维生素K1和维生素K2(MK4)混合标准溶液,且所述至少三种浓度混合标准溶液中内标物浓度一致;根据所述至少三种浓度混合标准溶液的检测结果,分别拟合维生素K1的标准曲线方程以及维生素K2(MK4)的标准曲线方程;向固定量的具有已知浓度内标物的混合内标溶液中,顺序添加待检测样品离心后的第一上清液和沉淀蛋白试剂,混合,并添加萃取剂,混合,高速离心,取第二上清液,其中,所述第一上清液的添加量为50~300μL;通过氮吹方式,吹干所述第二上清液,通过复溶液溶解吹干后的剩余物,混合,高速离心,取第三上清液;利用高效液相串联质谱仪,检测所述第三上清液;基于所述第三上清液的检测结果和维生素K1的标准曲线方程以及维生素K2(MK4)的标准曲线方程,得到所述待检测样品中维生素K1和维生素K2(MK4)的浓度。
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