[发明专利]一种水稻生长素输出蛋白OsPIN1b抗体的制备方法及其应用有效
| 申请号： | 201910652459.2 | 申请日： | 2019-07-19 |
| 公开（公告）号： | CN110357956B | 公开（公告）日： | 2023-03-24 |
| 发明（设计）人： | 杜云龙;万媛媛;韩丽;赵宜婷 | 申请（专利权）人： | 杜云龙 |
| 主分类号： | C07K16/06 | 分类号： | C07K16/06;C07K16/16;G01N33/68 |
| 代理公司： | 昆明合盛知识产权代理事务所(普通合伙) 53210 | 代理人： | 牛林涛 |
| 地址： | 650000 云南省昆明市五*** | 国省代码： | 云南;53 |
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| 摘要： | 一种水稻生长素输出蛋白OsPIN1b抗体的制备方法，包括如下步骤：通过生物信息学方法分析水稻生长素输出蛋白OsPIN1b，从OsPIN1b氨基酸序列中选取一段序列为QSSRNPTPRGSSFNC的多肽序列，按照多肽序列合成多肽，再将多肽与载体偶联后得到多肽抗原，将多肽抗原注射入新西兰白兔，初次免疫后，进行3次加强免疫，经血清分离纯化获得水稻生长素输出蛋白OsPIN1b多克隆抗体。本方法制备的多克隆抗体能够通过免疫印迹技术特异性识别水稻中生长素输出蛋白OsPIN1b，为揭示植物生长素输出载体蛋白PIN家族调控生长素的极性运输与植物发育机制提供理论基础，在生长素输出蛋白PIN1的检测和功能鉴定中具有广泛用途。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 水稻 生长素 输出 蛋白 ospin1b 抗体 制备 方法 及其 应用 | ||
【主权项】：
1.一种水稻生长素输出蛋白OsPIN1b抗体的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：1)通过生物信息学分析水稻Oryza sativa subsp.japonica (Nipponbare)基因OsPIN1b(LOC_Os02g50960 or Os02g0743400)表达的蛋白OsPIN1b；2)从编码蛋白OsPIN1b中选取一段多肽序列QSSRNPTPRGSSFNC用于制备抗体；3)按照步骤2中的多肽序列合成多肽；4)将多肽与载体偶联后得到多肽抗原；5)将多肽抗原注射入新西兰白兔，初次免疫后，进行3次加强免疫，经血清分离纯化获得水稻生长素输出蛋白OsPIN1b多克隆抗体，所述抗体IgG浓度为0.51mg/mL；6)间接ELISA法对多克隆抗体的效价进行评价。
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