[发明专利]一种假诺卡氏菌株的遗传转化方法及其应用在审
| 申请号： | 201910668385.1 | 申请日： | 2019-07-23 |
| 公开（公告）号： | CN110408641A | 公开（公告）日： | 2019-11-05 |
| 发明（设计）人： | 彭文舫;王柏炀;郑艳丽;易犁;张桂敏;马立新 | 申请（专利权）人： | 湖北大学 |
| 主分类号： | C12N15/74 | 分类号： | C12N15/74;C12N15/65;C12R1/01 |
| 代理公司： | 北京金智普华知识产权代理有限公司 11401 | 代理人： | 杨采良 |
| 地址： | 430062 湖北*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明属于微生物技术领域，尤其涉及一种假诺卡氏菌株(Pseudonocardia sp.WBY129428)的遗传转化方法及其应用。本发明首先将pSET152质粒转化到ETU(pUZ8002)大肠杆菌菌株中，然后通过细菌接合作用将pSET152质粒转移到假诺卡氏菌的孢子内。本发明的目的在于将外源DNA通过接合转移的方式导入到假诺卡氏菌菌株，并提供完善的假诺卡氏菌菌株遗传操作体系。 | ||
| 搜索关键词： | 假诺卡氏菌 遗传转化 微生物技术领域 大肠杆菌菌株 菌株遗传 细菌接合 质粒转化 质粒转移 外源DNA 接合 菌株 孢子 应用 | ||
【主权项】：
1.一种假诺卡氏菌株的遗传转化方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1：将假诺卡氏菌置于CP培养基培养，获取孢子；步骤2：将pSET152质粒转化至感受态细胞，并置于含抗生素的LB培养基培养；步骤3：将步骤1获得的假诺卡氏菌孢子与步骤2获得的转化后的感受态细胞混合，并置于ISP4固体培养基培养；步骤4：将阿泊拉霉素和萘啶酮酸覆盖步骤3中的ISP4固体平板，继续培养完成接合转移。
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