[发明专利]一种原代肝细胞冻存液、肝细胞冻存的方法及肝细胞复苏的方法

摘要

本发明公开了一种原代肝细胞冻存液、肝细胞冻存的方法及肝细胞复苏的方法，属于原代肝细胞冻存与复苏领域。所述原代肝细胞冻存液，由如下体积百分数的组分组成：45％溶液A、10％‑45％胎牛血清、10％二甲基亚砜和0％‑35％水，所述溶液A由如下组分组成：D‑葡萄糖、羟乙基淀粉、乳糖酸、聚乙烯吡咯烷酮、五水D‑棉子糖、氢氧化钾、磷酸二氢钾、七水硫酸镁、腺苷、还原性谷胱甘肽、别嘌醇、牛磺熊去氧胆酸和甘草酸二氨。本发明还公开了一种肝细胞冻存的方法及肝细胞复苏的方法。本发明的原代肝细胞冻存液可以降低原代肝细胞在冻存过程中的损伤、提高解冻后原代肝细胞活力与贴壁效率，可广泛用于肝脏基础研究与新药研发过程中。

主权项

1.一种原代肝细胞冻存液，其特征在于，由如下体积百分数的组分组成：45％的溶液A、10％-45％的胎牛血清、10％的二甲基亚砜和0％-35％的水，其中，所述溶液A由如下组分组成：100mg/mL-140mg/mL的D-葡萄糖、90mg/mL-130mg/mL羟乙基淀粉、70mg/mL-90mg/mL乳糖酸、40mg/mL-60mg/mL聚乙烯吡咯烷酮、30mg/mL-50mg/mL五水D-棉子糖、10mg/mL-15mg/mL氢氧化钾、6mg/mL-9mg/mL磷酸二氢钾、2mg/mL-4mg/mL七水硫酸镁、2mg/mL-4mg/mL腺苷、1mg/mL-3mg/mL还原性谷胱甘肽、0.2mg/mL-0.4mg/mL别嘌醇、5×10^-3mg/mL-7×10^-3mg/mL牛磺熊去氧胆酸和1×10^-3mg/mL-10mg/mL甘草酸二氨，调pH值至7.4,4℃保存。/n