[发明专利]一种基于LAMP技术的堪萨斯分枝杆菌可视化检测方法有效
| 申请号： | 201910700776.7 | 申请日： | 2019-07-31 |
| 公开（公告）号： | CN110273015B | 公开（公告）日： | 2023-10-13 |
| 发明（设计）人： | 张书 | 申请（专利权）人： | 四川省疾病预防控制中心 |
| 主分类号： | C12Q1/689 | 分类号： | C12Q1/689;C12Q1/6844;C12Q1/04 |
| 代理公司： | 北京远创理想知识产权代理事务所(普通合伙) 11513 | 代理人： | 张素妍 |
| 地址： | 610000 *** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | 本发明通过设计LAMP反应体系的引物混合液并在LAMP反应之后利用横流生物传感条进行检测，获得了一种堪萨斯分枝杆菌可视化检测方法。本发明设计的引物混合液的引物序列为：F3：GGCAATGTCGATGACAACAG；B3：ACATCGGCCAGATCCTG；FIP：CCGAGCCGAACCAGATCGTGCTGCAGTTCGGCCTCCT；BIP：AAGGTTGGCCGCCCAGTAAACCCACCTGGGATGG；LF：GACTCCGGTGTTCGA；LB：GTGAACCCGCGATCT。本发明的检测限低，对于DNA样品的检测限仅为1fg/μL，对于唾液样品的检测限仅为50CFU/mL。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 基于 lamp 技术 堪萨斯 分枝杆菌 可视化 检测 方法 | ||
【主权项】：
1.一种基于LAMP技术的堪萨斯分枝杆菌可视化检测方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：(1)构建LAMP反应体系，体系由引物混合液、反应缓冲液、Bst DNA聚合酶、去离子水和待测DNA构成；进行LAMP反应时，在60～70℃下进行延伸反应，在80～95℃下进行终止反应；(2)利用横流生物传感条对步骤(1)LAMP反应产物进行检测，在硝酸纤维素膜上发现两条红线，即表示待测DNA来自于堪萨斯分枝杆菌；所述反应缓冲液为脱氧核糖核酸恒温扩增试剂盒中的2×反应缓冲液；所述引物混合液中的引物的序列由5′–3′如下：![]()
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