[发明专利]一种毛囊干细胞的移植方法有效

专利信息
申请号: 201910700826.1 申请日: 2019-07-31
公开(公告)号: CN110484490A 公开(公告)日: 2019-11-22
发明(设计)人: 陈相波;雷鸣;田朋飞;应荣 申请(专利权)人: 杭州荣泽生物科技有限公司
主分类号: C12N5/074 分类号: C12N5/074;A61L27/38;A61L27/50
代理公司: 31253 上海精晟知识产权代理有限公司 代理人: 刘增玉<国际申请>=<国际公布>=<进入
地址: 311215 浙江省杭州*** 国省代码: 浙江;33
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摘要: 发明公开了一种毛囊干细胞的移植方法,所述一种毛囊干细胞的移植方法包括以下步骤:(1)首先在无菌室中取人体头皮组织,随后将头皮组织中加入中性蛋白酶进行消化清洗,清洗后按照毛囊生长方向拔出完整的毛囊;(2)制备第一干细胞培养基。本发明采用全新配方的第一干细胞培养基可以是毛囊干细胞可以快速的增长,可以为其提供大量的营养物质,本发明通过设置第二干细胞培养基可以快速扩增干细胞,可以使其相对于常规干细胞提高一倍以上,而且其适应性较强,这种移植方法可以使被移植的毛囊干细胞成活率达到95%以上,而且移植方式合理高效,便于推广。
搜索关键词: 毛囊干细胞 干细胞培养基 移植 干细胞 清洗 中性蛋白酶 毛囊生长 人体头皮 头皮组织 营养物质 无菌室 拔出 扩增 毛囊 制备 成活率 配方 消化
【主权项】:
1.一种毛囊干细胞的移植方法,其特征在于:所述一种毛囊干细胞的移植方法包括以下步骤:/n(1)首先在无菌室中取人体头皮组织,随后将头皮组织中加入中性蛋白酶进行消化清洗,清洗后按照毛囊生长方向拔出完整的毛囊;/n(2)制备第一干细胞培养基,所述第一干细胞培养基添加的营养成分包括谷氨酰胺、氢离子缓冲剂、氢化可的松、牛胰岛素、转铁蛋白、亚硒酸钠、青霉素、链霉素和生理盐水,所述第一干细胞培养基添加的营养成分的重量份数为谷氨酰胺1.8-2.2mmol/L,氢离子缓冲剂1.9-2.1mmol/L,氢化可的松9-11ng/mL,牛胰岛素9.5-10.5ug/mL,转铁蛋白9-10.5ug/mL,亚硒酸钠9-11ng/mL,青霉素98-102U/mL,链霉素95-105ug/mL;/n(3)将步骤(1)得到的完整毛囊放入步骤(2)得到的第一干细胞培养基中进行培养,所述第一干细胞培养基培养温度为36-38℃;/n(4)制备第二干细胞培养基,所述第二干细胞培养基添加的营养成分包括血清替代物、维生素C、干细胞生长因子、谷氨酰胺、血小板源生长因子和生理盐水,所述第二干细胞培养基添加的营养成分的重量份数为血清替代物9-12ug/mL、维生素C40-60ug/mL、干细胞生长因子6-8ng/mL、谷氨酰胺3-5mmol/mL、血小板源生长因子11-13ng/mL,/n(5)将步骤(3)培养的完整毛囊干细胞汇合度长至50-60%时将其转移至第二干细胞培养基中,在培养过程中第一干细胞培养基每24-36h更换一次;/n(6)将步骤(5)在第二干细胞培养基培养的完整毛囊干细胞汇合度长至80-90%时进行传代,在培养过程中第二干细胞培养基每36-48h更换一次,所述第二培养基培养温度为36-38℃;/n(7)根据待移植的位置,将步骤(3)培养完成的毛囊干细胞注射至待移植的部位,在注射过程中采用分散注射的方式进行注射,每次注射点应在120-160个,注射过程中每间隔20-30天注射一次。/n
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