[发明专利]一种体外维持乳腺癌干细胞干性的三维球形体培养方法有效

专利信息
申请号: 201910707496.9 申请日: 2019-08-01
公开(公告)号: CN110396501B 公开(公告)日: 2020-10-30
发明(设计)人: 张洁心;张世昌;查小明 申请(专利权)人: 江苏省人民医院(南京医科大学第一附属医院)
主分类号: C12N5/095 分类号: C12N5/095
代理公司: 南京天华专利代理有限责任公司 32218 代理人: 傅婷婷
地址: 210029 江*** 国省代码: 江苏;32
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摘要: 发明公开了一种体外维持乳腺癌干细胞干性的三维球形体培养方法。采用旋转生物反应器对人乳腺癌干细胞进行三维球形体培养,直接获得乳腺癌干细胞球体,所得细胞为ALDH1+/CD44+/CD24表型,是公认的乳腺癌干细胞表型,该发明方法是可靠的乳腺癌干细胞体外培养方法。本发明操作简单,且与低粘附材料法、悬滴法、凝胶法等现有技术相比,大幅提高了干细胞成球率,延长了干性维持时间可达至少21天,可大规模扩增培养,且极大降低了试剂耗材和人力资源等方面的成本。
搜索关键词: 一种 体外 维持 乳腺癌 干细胞 干性 三维 球形 培养 方法
【主权项】:
1.一种体外维持乳腺癌干细胞干性的三维球形体培养方法,其特征在于包括如下步骤:1)将单细胞状态的人乳腺癌干细胞加入干细胞培养基中,制成细胞悬液;2)向旋转生物反应器中加入细胞悬液,设置其转速;3)将旋转生物反应器置于细胞培养箱内培养,每2~4天更换干细胞培养基一次;4)培养2~7天,即得到合适大小乳腺癌干细胞球形体。
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