[发明专利]基于DNA四面体的固态纳米孔单分子蛋白质检测方法有效
| 申请号： | 201910716246.1 | 申请日： | 2019-08-05 |
| 公开（公告）号： | CN110231392B | 公开（公告）日： | 2021-09-28 |
| 发明（设计）人： | 刘全俊;朱立博;韩笑明;周晓祥;徐颖;苏振;张振;黄炎;陆祖宏 | 申请（专利权）人： | 东南大学 |
| 主分类号： | G01N27/48 | 分类号： | G01N27/48 |
| 代理公司： | 南京苏高专利商标事务所(普通合伙) 32204 | 代理人： | 陈风平 |
| 地址： | 211102 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种基于DNA四面体的固态纳米孔单分子蛋白质检测信号放大方法及其使用的DNA四面体。本发明所述的方法包括：制备具有三维空间结构的DNA四面体：所述DNA四面体由四片核酸瓦片杂交合成，所述核酸瓦片由第一单链核酸、第二单链核酸、第三单链核酸杂交合成；DNA四面体与待测蛋白质分子连接；采用固态纳米孔检测平台进行检测；本发明克服了单分子蛋白质在应用纳米孔传感器检测时过孔速度过快的缺陷，增加检测信号的电流变化幅值，克服检测过程中蛋白质团聚的发生，样品消耗量小，检测的灵敏度高。 | ||
| 搜索关键词： | 基于 dna 四面体 固态 纳米 分子 蛋白质 检测 方法 | ||
【主权项】：
1.一种基于DNA四面体的固态纳米孔单分子蛋白质检测信号放大方法，其特征在于：包括以下步骤：(1)制备具有三维空间结构的DNA四面体：所述DNA四面体由四片核酸瓦片杂交合成；所述核酸瓦片由第一单链核酸、第二单链核酸及第三单链核酸杂交合成；所述第一单链核酸序列由78个碱基组成，所述第一单链核酸序列如SEQ ID NO：1，所述第二单链核酸序列由42个碱基组成，所述第二单链核酸序列如SEQ ID NO：2，所述第三单链核酸序列由31个碱基组成，所述第三单链核酸序列的5’末端修饰有一个羧基基团，所述第三单链核酸序列如SEQ ID NO：3；(2)DNA四面体与待测蛋白质分子连接：将步骤(1)中制备的DNA四面体与1‑(3‑二甲氨基丙基)‑3‑乙基碳二亚胺盐酸盐、N‑羟基琥珀酰亚胺混合，加入所述待测蛋白质分子，形成DNA四面体与蛋白质复合物；(3)采用固态纳米孔检测平台进行检测：将步骤(2)中所得的DNA四面体与蛋白质复合物溶液加入到固态纳米孔检测平台进行检测。
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