[发明专利]双色荧光示踪胶质瘤干细胞微环境模型的制备方法在审
| 申请号： | 201910724265.9 | 申请日： | 2019-08-07 |
| 公开（公告）号： | CN110499294A | 公开（公告）日： | 2019-11-26 |
| 发明（设计）人： | 董军;王海洋;施佳;刘亮;姜倩倩;黄强 | 申请（专利权）人： | 苏州大学附属第二医院 |
| 主分类号： | C12N5/10 | 分类号： | C12N5/10;C12N15/867;G01N21/64;C12Q1/02 |
| 代理公司： | 11400 北京商专永信知识产权代理事务所(普通合伙) | 代理人： | 高之波<国际申请>=<国际公布>=<进入 |
| 地址： | 215000 江苏省苏州市姑*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了双色荧光示踪胶质瘤干细胞微环境模型的制备方法。该制备方法包括体外培养GSCs；将具有嘌呤霉素抗性的慢病毒转染红色荧光蛋白(RFP)基因于GSCs；将稳定表达RFP的GSCs接种至全身表达绿色荧光蛋白(GFP)balb/c裸小鼠体内，构建双色荧光示踪异种移植瘤模型；将稳定表达RFP的GSCs与全身表达绿色荧光蛋白(GFP)balb/c裸小鼠骨髓细胞体外共培养，构建双色荧光示踪体外细胞共培养模型；荧光共聚焦显微镜下观察两种荧光细胞的相互作用。本发明具有通过两种荧光分别标记胶质瘤干细胞与微环境中间质细胞，使二者在细胞层面上的相互作用，在荧光显微镜下可见，为体内体外肿瘤微环境的研究提供了一种有效的研究方法的效果。 | ||
| 搜索关键词： | 双色荧光 胶质瘤干细胞 绿色荧光蛋白 稳定表达 裸小鼠 微环境 荧光 构建 示踪 制备 体内 共聚焦显微镜 红色荧光蛋白 细胞共培养 荧光显微镜 肿瘤微环境 体外培养 细胞层面 异种移植 荧光细胞 嘌呤霉素 慢病毒 示踪体 抗性 体外 转染 骨髓 接种 细胞 研究 基因 观察 | ||
【主权项】：
1.双色荧光示踪胶质瘤干细胞微环境模型的制备方法，其特征在于，包括以下步骤，/nS1，体外培养GSCs；/nS2，将具有嘌呤霉素抗性的慢病毒转染红色荧光蛋白(RFP)基因于GSCs；/nS3，将稳定表达RFP的GSCs接种至全身表达绿色荧光蛋白(GFP)balb/c裸小鼠体内，构建双色荧光示踪异种移植瘤模型；/nS4，将稳定表达RFP的GSCs与全身表达绿色荧光蛋白(GFP)balb/c裸小鼠骨髓细胞体外共培养，构建双色荧光示踪体外细胞共培养模型；/nS5，荧光共聚焦显微镜下观察两种荧光细胞的相互作用。/n
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