[发明专利]一种过氧化氢全细胞生物传感器及其制备与应用有效

专利信息
申请号: 201910725741.9 申请日: 2019-08-07
公开(公告)号: CN110423773B 公开(公告)日: 2021-08-03
发明(设计)人: 高义舟 申请(专利权)人: 妙合圣华(上海)生物科技有限公司
主分类号: C12N15/78 分类号: C12N15/78;C12N1/21;G01N21/76;G16B25/10;C12R1/40
代理公司: 上海科盛知识产权代理有限公司 31225 代理人: 褚明伟
地址: 201800 上海市嘉定*** 国省代码: 上海;31
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摘要: 发明涉及一种过氧化氢全细胞生物传感器及其制备与应用。本发明首先构建pCM‑lux载体,再构建pCM‑lux‑PahpC质粒,再将构建好的pCM‑lux‑PahpC质粒转入恶臭假单胞菌Pseudomonas putida KT2440中,得到过氧化氢全细胞生物传感器KT2440OX。将KT2440OX菌株的菌液加入待测过氧化氢样品中,读取样品的相对发光强度,利用已知浓度的H2O2样品中加入KT2440OX菌株的菌液后的相对发光强度,建立H2O2浓度与相对发光强度之间的关系,再利用样品的相对发光强度计算样品中的H2O2浓度。与现有技术相比,本发明可建立科学、准确、快速检测过氧化氢含量的方法,特别适用于直接检测样品中残留的过氧化氢,为国家相关部门制定相应的检测标准,提供一些意见和帮助,是一个非常有前途的过氧化氢残留量的检测方法。
搜索关键词: 一种 过氧化氢 细胞 生物 传感器 及其 制备 应用
【主权项】:
1.一种过氧化氢全细胞生物传感器的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)构建pCM‑lux载体:使用同源重组的方法将lux报告基因连接进入pCMgfp‑lacZ质粒,构建pCM‑lux载体;(2)构建pCM‑lux‑PahpC载体:使用同源重组的方法将恶臭假单胞菌Pseudomonas putida KT2440中ahpC基因的启动子PahpC连接进入pCM‑lux质粒,构建pCM‑lux‑PahpC载体;(3)将构建好的pCM‑lux‑PahpC载体测序确认后,转入恶臭假单胞菌Pseudomonas putida KT2440中,所得菌株称之为KT2440OX菌株,即为过氧化氢全细胞生物传感器。
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