[发明专利]长裂苦苣菜生物碱四级分离物及其分离方法和应用

摘要

本发明属于农业生物技术领域，具体涉及长裂苦苣菜生物碱四级分离物及其分离方法和应用。本发明通过超声方法提取长裂苦苣菜提取其中的生物碱成分，并利用制备色谱分离得到具有抗氧化能力的四级分离物，对长裂苦苣菜中生物碱类化合物的开发利用具有重要的现实意义。

主权项

1.长裂苦苣菜生物碱四级分离物，其特征在于，所述四级分离物由包括以下步骤的方法制备得到：/n(1)制备长裂苦苣菜提取物；/n(2)将步骤(1)得到的长裂苦苣菜提取物配制成100mg/mL的供试液，采用制备色谱法进行分离，色谱条件如下：/n采用C18硅胶柱，以0.1％甲酸水溶液为流动相A，以甲醇为流动相B，流速10mL/min，柱温27-33℃，波长为255-265nm，梯度洗脱程序为：/n在0-5min的时间范围内，流动相A的体积由95％变为60％，流动相B的体积由5％变为40％；/n在5-15min的时间范围内，流动相A的体积由60％变为30％，流动相B的体积由40％变为70％；/n在15-30min的时间范围内，流动相A的体积由30％变为20％，流动相B的体积由70％变为80％；/n在30-35min的时间范围内，流动相A的体积保持为20％，流动相B的体积保持为80％；/n收集峰高范围在420-2000mAU的馏分，得到初级分离物；/n(3)将步骤(2)得到的初级分离物浓缩、干燥后，配制成10mg/mL的供试液并采用制备色谱法分离，色谱条件如下：/n采用C18硅胶柱，以0.1％甲酸水溶液为流动相A，以甲醇为流动相B，流速10mL/min，柱温27-33℃，波长为255-265nm，梯度洗脱程序为：/n在0-5min的时间范围内，流动相A的体积由95％变为60％，流动相B的体积由5％变为40％；/n在5-15min的时间范围内，流动相A的体积由60％变为30％，流动相B的体积由40％变为70％；/n在15-30min的时间范围内，流动相A的体积由30％变为20％，流动相B的体积由70％变为80％；/n在30-35min的时间范围内，流动相A的体积保持为20％，流动相B的体积保持为80％；/n收集峰高范围在0.2-1.8AU的馏分，得到次级分离物；/n(4)将步骤(3)得到的次级分离物浓缩、干燥后，配制成10mg/mL的供试液并采用制备色谱法分离，色谱条件如下：/n采用C18硅胶柱，以0.1％甲酸水溶液为流动相A，以甲醇为流动相B，流速1mL/min，柱温30℃，波长为260nm，梯度洗脱程序为：/n在0-8min的时间范围内，流动相A的体积由95％变为75％，流动相B的体积由5％变为25％；/n在8-10min的时间范围内，流动相A的体积由75％变为65％，流动相B的体积由25％变为35％；/n在10-20min的时间范围内，流动相A的体积由65％变为40％，流动相B的体积由35％变为60％；/n在20-24min的时间范围内，流动相A的体积由40％变为20％，流动相B的体积有60％变为80％；/n在24-27min的时间范围内，流动相A的体积保持为20％，流动相B的体积保持为80％，收集16-18min的馏分，得到三级分离物；/n(5)用HPLC法分离步骤(4)得到的三级分离物，色谱条件如下：/n以0.1％甲酸水溶液为流动相A，以乙腈为流动相B，流速0.3mL/min，柱温30℃，波长260nm，梯度洗脱程序为：/n在0-10min时间范围内，流动相B的体积由5％变为95％，流动相A的体积由95％变为5％，收集5.8-6.2min的馏分，得到四级分离物。/n