[发明专利]一种外源基因定点整合的打靶载体及其应用在审
| 申请号： | 201910727202.9 | 申请日： | 2019-08-07 |
| 公开（公告）号： | CN110564764A | 公开（公告）日： | 2019-12-13 |
| 发明（设计）人： | 李奎;阮进学;韩晓松;熊友才;庄荣志;裴杨莉;杨亚岚;周荣;于辉;张垒霞 | 申请（专利权）人： | 佛山科学技术学院 |
| 主分类号： | C12N15/85 | 分类号： | C12N15/85;C12N15/90 |
| 代理公司： | 44205 广州嘉权专利商标事务所有限公司 | 代理人： | 朱继超 |
| 地址： | 528000 广东*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本公开提供了一种外源基因定点整合的打靶载体，所述打靶载体是由表达载体的多克隆位点反向插入打靶序列而成，打靶序列从左到右依次为左侧同源臂序列、2A剪切肽编码序列、外源基因和右侧同源臂序列，左侧同源臂序列为猪B2M基因终止密码子上游序列，右侧同源臂序列为猪B2M基因终止密码子下游序列，猪B2M基因终止密码子位于猪B2M基因第3外显子上。所述打靶载体所使用的B2M基因能够在机体中产生一种内源性低分子量血清蛋白质，在多种细胞和组织中表达量是恒定的，不受其他因素的影响，所构建的打靶载体可将任意外源基因序列定点整合至猪B2M基因下游，能够高效构建稳转外源基因的细胞系及转基因猪模型，为基因功能研究及制备转基因猪提供有用的工具。 | ||
| 搜索关键词： | 打靶载体 同源臂 终止密码子 打靶序列 定点整合 构建 基因功能研究 外源基因序列 多克隆位点 血清蛋白质 制备转基因 种外源基因 肽编码序列 表达载体 低分子量 上游序列 外源基因 下游序列 转基因猪 剪切 表达量 恒定的 内源性 外显子 转外源 细胞 基因 | ||
【主权项】：
1.一种外源基因定点整合的打靶载体，其特征在于，所述打靶载体是由表达载体的多克隆位点反向插入打靶序列而成，所述打靶序列从左到右依次为左侧同源臂序列、2A剪切肽编码序列、外源基因和右侧同源臂序列，所述的左侧同源臂序列为猪B2M基因终止密码子的上游序列，所述右侧同源臂序列为猪B2M基因终止密码子的下游序列，所述猪B2M基因终止密码子位于猪B2M基因第3外显子上。/n
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