[发明专利]简易高效的鲟鱼白细胞分离方法在审
| 申请号： | 201910744686.8 | 申请日： | 2019-08-13 |
| 公开（公告）号： | CN110438075A | 公开（公告）日： | 2019-11-12 |
| 发明（设计）人： | 赵振新;杨明举;李道友;赵飞;刘伟;赵凤 | 申请（专利权）人： | 贵州省水产研究所 |
| 主分类号： | C12N5/078 | 分类号： | C12N5/078 |
| 代理公司： | 贵阳中新专利商标事务所 52100 | 代理人： | 李亮;程新敏 |
| 地址： | 550025 贵州省*** | 国省代码： | 贵州;52 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种简易高效的鲟鱼白细胞分离方法。本发明的操作简单，能一次性分离出大量的白细胞，并且分离出来白细胞的纯度高；克服了现有技术中，鱼类白细胞的分离方法步骤复杂，操作难度高，且单次分离效果不理想，且需要多次富集的问题。因此，本发明能弥补鲟鱼白细胞分离相关研究的空白，为鲟鱼在免疫机能上的研究提供理论支撑。 | ||
| 搜索关键词： | 白细胞 鲟鱼 简易 一次性分离 分离效果 理论支撑 免疫机能 富集 鱼类 研究 | ||
【主权项】：
1.一种简易高效的鲟鱼白细胞分离方法，其特征在于，包括如下工艺步骤：1)将鲟鱼的离体血液与抗凝剂按照1～2:1～3的体积比进行混合，在4℃环境下静置1‑1.5小时，然后离心并收集上清，获得血液上清液；2)将Percoll原液与NaCl溶液按照9:1的体积比混合配制成的Percoll液，再用NaCl溶液将Percoll液稀释成所需体积比重的分离液；其中，NaCl溶液的质量浓度为0.85％；3)取无菌离心管，用胎牛血清对离心管进行润洗后，加入分离液，再沿管壁缓慢加入步骤1)中的血液上清液，使用水平转子400g‑500g离心25‑30min，管中液体分为三层，中间层为鲟鱼白细胞。
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