[发明专利]一种限制性内切酶介导的引物自生成滚环扩增方法有效
申请号: | 201910752112.5 | 申请日: | 2019-08-15 |
公开(公告)号: | CN110484606B | 公开(公告)日: | 2022-07-22 |
发明(设计)人: | 梁兴国;安然;王晨儒;张伯颖;于姝婷 | 申请(专利权)人: | 中国海洋大学 |
主分类号: | C12Q1/6844 | 分类号: | C12Q1/6844 |
代理公司: | 青岛中天汇智知识产权代理有限公司 37241 | 代理人: | 刘晓娟 |
地址: | 266101 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | 本发明涉及一种限制性内切酶介导的引物自生成滚环扩增方法,包括如下步骤:1)将单链DNA在限制性内切酶的酶切位点进行硫代修饰;2)将硫代修饰后的单链DNA进行环化,得到硫代修饰的单链环状DNA;3)以步骤2)所得的硫代修饰的单链环状DNA为扩增模板,将扩增模板加入到含有待检测的目标DNA引物、具有链置换作用的DNA聚合酶和限制性内切酶的反应体系中进行多轮滚环扩增反应,目标DNA的分子信号被放大。本发明滚环扩增方法的有益效果是:1)利用限制性内切酶引发引物的自生成反应,构建出限制性内切酶介导的滚环扩增技术,可保证高扩增效率并拓宽其应用范围;操作简单、在恒温条件下即可实现核酸扩增反应。 | ||
搜索关键词: | 一种 限制性 内切酶介导 引物 生成 扩增 方法 | ||
【主权项】:
1.一种限制性内切酶介导的引物自生成滚环扩增方法,其特征在于,包括如下步骤:/n1)将单链DNA在限制性内切酶的酶切位点进行硫代修饰;/n2)将硫代修饰后的单链DNA进行环化,得到硫代修饰的单链环状DNA;/n3)以步骤2)所得的硫代修饰的单链环状DNA为扩增模板,将扩增模板加入到含有待检测的目标DNA引物、具有链置换作用的DNA聚合酶和限制性内切酶的反应体系中进行多轮滚环扩增反应,目标DNA的分子信号被放大。/n
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