[发明专利]一种阿维菌素菌种选育方法在审

专利信息
申请号: 201910755568.7 申请日: 2019-08-15
公开(公告)号: CN110305818A 公开(公告)日: 2019-10-08
发明(设计)人: 李娜;樊乐;赵艳杰 申请(专利权)人: 齐鲁制药(内蒙古)有限公司
主分类号: C12N1/20 分类号: C12N1/20;C12Q1/06;C12R1/545
代理公司: 济南金迪知识产权代理有限公司 37219 代理人: 张宏松
地址: 010080 内蒙古自治区*** 国省代码: 内蒙古;15
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摘要: 发明涉及一种阿维菌素菌种选育方法,该方法将阿维菌素孢子液稀释后经平面培养、斜面培养、种子培养、发酵培养得到高效价的单菌落并进行保种,平板培养基按质量百分比计,由以下组分组成:无水葡糖糖1‑5%、酵母浸粉0.1‑0.5%、磷酸氢二钾0.05‑0.5%、氯化钠0.3‑1.5%、琼脂1‑8%、余量为水;本发明的选育方法可以提高单菌落的孢子数量以及形态规则饱满的单菌落,与传统阿维菌种育种方法相比,大大的提高了得到高产菌的机率,提高筛选效率、节约筛选成本,平面培养基培养得到的阿维菌素单菌落孢子产量高,形态规则,呈火山状、草帽型。
搜索关键词: 阿维菌素 单菌落 菌种选育 形态规则 孢子 氯化钠 筛选 磷酸氢二钾 平板培养基 平面培养基 质量百分比 发酵培养 酵母浸粉 平面培养 斜面培养 种子培养 高产菌 高效价 葡糖糖 孢子液 保种 琼脂 无水 稀释 菌种 草帽 育种 节约
【主权项】:
1.一种阿维菌素菌种选育方法,包括步骤如下:(1)平面培养:将冻存的阿维菌素孢子液用无菌水稀释得到孢子悬浮液,将孢子悬浮液涂覆在平板培养基上,将平板培养基置于温度26‑29℃的恒温条件下培养7‑10天进行分离纯化,完成平面培养,所述平板培养基按质量百分比计,由以下组分组成:无水葡糖糖1‑5%、酵母浸粉0.1‑0.5%、磷酸氢二钾0.05‑0.5%、氯化钠0.3‑1.5%、琼脂1‑8%、余量为水;(2)斜面培养:平面培养结束后在无菌室内挑选平板培养基上的阿维菌素单菌落,采用接种针将阿维菌素单菌落接种于斜面培养基上进行斜面培养;(3)种子培养:将步骤(2)培养成熟的斜面菌种接于种子瓶培养基上,将种子瓶置于摇床上进行摇床培养,得到种子液;(4)发酵培养:将种子液转接于发酵瓶培养基中,将发酵瓶置于摇床上进行摇床培养;(5)单菌落效价测试:发酵培养结束后采用HPLC法测试单菌落效价,高效价者进行保种。
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