[发明专利]非洲猪瘟病毒荧光型RAA检测试剂盒

摘要

本发明公开了一种非洲猪瘟病毒荧光型RAA检测试剂盒，包括特异性引物ASFV‑F和ASFV‑R，以及RAA‑exo探针ASFV‑P，用四氢呋喃(THF残基)，dT‑荧光团和dT‑淬灭团取代靶标扩增子序列内的碱基，标记的报告荧光染料为FAM，荧光淬灭基团为BHQ‑1，试剂中的核酸外切酶可在THF位点裂解探针，从而分离荧光基团和淬灭基团并产生荧光信号。本发明提供的试剂盒可在37～42℃恒温条件下，20min内实现非洲猪瘟病毒的检测，特异性为100％，检测敏感性为10copies/μl。因此，本发明的试剂盒具有操作简单、快速、灵敏的特点，为非洲猪瘟病毒的现场快速检测筛查提供有效的技术手段。

主权项

1.一种非洲猪瘟病毒荧光型RAA检测试剂盒，包括特异性引物ASFV‑F和ASFV‑R，以及标记有THF残基的RAA‑exo探针ASFV‑P，探针标记的报告荧光染料为FAM，标记的荧光淬灭基团为BHQ‑1；其中特异性引物和RAA‑exo探针序列如下：ASFV‑F:5′‑TCGCCGAAGGGAATGGATACTGAGGGAATA‑3′；ASFV‑R:5′‑AGGGGATAAAATGACTGGATATAAGCACTTGGT‑3′；ASFV‑P:5′‑TGCGTATCATTTTCATCGGTAAGAATAGGTT[FAM‑dT][THF]C[BHQ1‑dT]TTGGTGCGGCTTGTGC‑3′。